【摘 要】
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为研究白洛克鸡与江西鸡在胚胎期肌纤维发育的差异,本文通过对两个品种鸡胚胎期不同发育阶段肌纤维形态学的考察,利用基因芯片筛选不同发育阶段的差异基因以及用荧光定量PCR法
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为研究白洛克鸡与江西鸡在胚胎期肌纤维发育的差异,本文通过对两个品种鸡胚胎期不同发育阶段肌纤维形态学的考察,利用基因芯片筛选不同发育阶段的差异基因以及用荧光定量PCR法检测MyoD、Myogenin、Myostatin和MYH7B等基因mRNA的表达模式和蛋白免疫印迹法检测MYH7蛋白的表达模式,旨在从组织学和基因表达水平来阐明这种表型差异的分子机理。
结果表明:
1.12胚龄时,两个品种腿肌肌纤维数量无显著差异;14、16和18胚龄时,白洛克鸡腿肌肌纤维数量显著低于江西鸡(P<0.05);20胚龄时白洛克鸡腿肌肌纤维数量显著高于江西鸡(P<0.05)。
2.表达谱芯片结果显示:白洛克鸡与江西鸡相比,4胚龄样品中检测出差异基因103个(上调基因25个,下调基因78个),10胚龄样品中检测出差异基因103个,(上调基因47个,下调基因56个);20胚龄样品中检测出差异基因501个,(上调基因218个,下调基因283个)。聚类分析显示,20胚龄时有5个与肌肉发育相关的差异表达基因。
3.荧光定量PCR结果表明:在胚胎发育中后期(12-17胚龄),白洛克鸡MyoD mRNA表达有低于江西鸡的趋势,16胚龄时差异极显著(P<0.01);12-14胚龄Myogenin mRNA和11、13、14、16和20胚龄Myostatin mRNA表达显著低于江西鸡(P<0.05);MYH7B mRNA在16-19胚龄时出现表达高峰,但两品种间无显著差异。
4.蛋白免疫印迹结果表明:14、16胚龄时,白洛克鸡MYH7蛋白表达量与江西鸡无显著差异,但18和20胚龄时高于江西鸡,并在18胚龄时差异显著(P.<0.05)。
综上所述,在胚胎中后期白洛克鸡的肌纤维发育慢于江西鸡而在胚胎发育的末期快于江西鸡;Myogenin和Myostatin可能参与到上述过程中,调控成肌细胞的分化速度。
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