环状RNA与甲状腺乳头状癌淋巴结转移关系的初步研究

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背景:环状RNA(circular RNA,circ RNA)是一种新发现的,在许多肿瘤的发生发展过程中发挥着重要作用的非编码RNA,有着作为新型肿瘤标志物的潜质;甲状腺乳头状癌(Papillary thyroid carcinoma,PTC)容易出现淋巴结转移,circ RNA在PTC淋巴结转移中的作用尚不清楚。方法:(1)选取伴颈侧区淋巴结转移的甲状腺微小乳头状癌(papillary thyroid microcarcinoma,PTMC)患者(转移组)和不伴颈侧区淋巴结转移的PTMC患者(非转移组)各20例,分别采集两组PTMC病例的肿瘤组织及对应癌旁组织,运用高通量测序技术检测circ RNAs的表达水平,筛选两组中2倍以上变化的circ RNAs为差异表达的circ RNA。(2)对差异表达的circ RNA做聚类分析和GO通路富集分析,推测甲状腺乳头状癌出现淋巴结转移的可能机制。(3)对其中表达显著差异的circ RNA FAF1进行初步功能探究。在TPC-1、BHP2-7细胞株上,应用细胞转染、CCK-8、划痕实验和Transwell实验,观察circ RNA FAF1对细胞株的调控作用;并通过star Base数据库等生物信息学方法预测与circ RNA FAF1相互作用的mi RNA。结果:(1)转移组肿瘤组织和癌旁组织的差异circ RNAs共2259条,非转移组肿瘤组织和癌旁组织的差异circ RNAs共2179条,转移组肿瘤组织和非转移组肿瘤组织的显著差异circ RNAs共17条。(2)样本聚类分析提示差异性表达的circ RNA可较好区分转移组组和非转移组;并且推测这些circ RNA可能通过autophagy,nuclear transport,protein polyubiquitination等通路发挥作用。(3)细胞功能实验发现敲除circ RNA-FAF1可显著抑制PTC细胞的增殖和侵袭能力;生物信息学预测circ RNA-FAF1可能与mi R-3194-5p、mi R-2116-3p、mi R-539-3p等产生“海绵”作用,从而在PTMC淋巴结转移中发挥一定作用。结论:在伴颈侧区淋巴结转移和不伴颈侧区淋巴结转移的PTMC中存在显著差异性表达的circ RNAs共17条,这些circ RNAs可能通过autophagy,nuclear transport,protein polyubiquitination等通路发挥作用;circ RNA-FAF1与甲状腺乳头状癌细胞的增殖和侵袭能力正相关。
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