洛伐他汀高产融合子的筛选及其发酵条件的优化

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洛伐他汀(Lovastatin)是一种来源于微生物的羟甲基戊二酰辅酶A还原酶抑制剂,是一类高效、安全、低毒的治疗高胆固醇症的药物,其主要产生菌为土曲霉(Aspergillus terreus)和红曲霉(Monascus spp.)。 为获得高产洛伐他汀的红曲霉菌株,本文将高产洛伐他汀的土曲霉Aspergillus terreus CA99与低产洛伐他汀的红曲霉Monascus anka M—3进行原生质体融合。在363株融合子中筛选得到19株发酵单位高于出发菌株的高产融合子,其中有10株发酵单位的提高幅度超过60%。 经过发酵实验研究,初步确定了适合于红曲霉液体发酵产生洛伐他汀的初始pH值、碳源、氮源、混合氮源。通过正交实验确定了单一氮源培养基最佳配比和混合氮源培养基最佳配比。研究了K2HPO4·3H2O和MgSO4·7H2O对发酵的影响。从而初步确定了红曲霉液体发酵产生洛伐他汀的培养基为:10%葡萄糖,0.5%牛肉浸膏,0.25%(NH42SO4,2%蕃茄酱,0.1%MgSO4·7H2O,0.1%CaCO3,pH6.5。出发菌株在此条件下的发酵单位为796μg/ml,融合子在此条件下发酵单位为1216μg/ml。
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