前言 在冠心病的诊断中，简单、迅速、无创评价心肌灌注具有重大意义。目前临床上仅能通过核素显像的方法评价心肌灌注。随着超声诊断仪器性能的不断提高和对声学造影剂研制的迅速发展，经静脉心肌造影超声心动图对心肌灌注进行评价已经成为可能。有关经静脉心肌造影的研究成为目前超声心动图领域颇引人注目的热点课题，但仍处于研究阶段，造影方法学、评价标准等尚都在探索中，缺乏统一性。在我国，由于没有商品化的造影剂而使该方面的研究较少。本研究应用声振法自制含氟碳气体的微泡造影剂，经静脉注射自制造影剂，应用间歇双触发结合二次谐波显像的方法，对犬进行经静脉心肌造影研究，观察犬正常状态下心肌显影情况及急性心肌缺血和再灌注后心肌灌注的变化，通过与病理对比分析，探讨该方法对心肌灌注研究的可行性和准确性，并进一步探讨心肌造影在评价冠状动脉阻断后梗死区和危险区、再灌注后心肌缺血的改善情况以及判定存活心肌方面的价值。 方法 造影剂制备 应用生理盐水将20％白蛋白稀释为5％的溶液，将5％的白蛋白与低分子(40)右旋糖酐混合溶液或5％白蛋白与5％葡萄糖混合溶液10ml，放入倒置的注射器外套管中，注射器外套管底端与三通连接，将超声粉碎仪探头放在混合溶液的液面下，使其刚刚低于液面。对每种不同的溶液分别以输出功率80、100两挡进行振荡，振荡时间选择三个时间段120s、150s和180s，在振荡的过程中匀速向液体内注入C3F8气体1ml。弃去底部0.5ml液体后，抽取振荡后的含微泡的溶液，封闭保存备用。每个条件制作三个样本。应用标尺显微镜下测量微泡的大小，应用改良的Neubauer法计数并计算微泡的浓度。 正常开胸犬心肌造影研究 动物准备：健康杂种犬2条，体重分别为17kg和20kg。将实验用犬仰卧位固定于实验台，应用 3％戊巴比妥钠静脉麻醉门0m牙kg厂右股静脉插管，输注液体和造影剂。气管插管，呼吸机人工呼吸。于胸骨正中开胸，切开心包，悬吊于胸壁，制成心包吊篮。 应用HP5500型超声诊断仪，将卜探头置于犬心脏前方特制的含生理盐水的水浴槽中。选择左室短轴乳头肌水平切面，采用contrast程序，间歇harmonic呈像，发放频率1．SMHz，接收频率3．6MHZ。机械指数为1．6，注射造影剂之前调整仪器增益，使心肌回声低至刚能辨认。其余设置取该程序默认值。保持仪器设置在整个实验中不变。应用20Inl注射器取造影剂12ITil，应用微量泵持续输注，速度为1．sml／min。应用双触发方式，双帧对比呈像，于心电图T波顶峰附近触发，从3：1开始，待造影剂在左室腔内达到充分显影后逐级递增至IO：1，每一级触发采样3个。双触发间隔极短，为 15 ms，第二次触发的图像作为”本底”定量分析心肌灌注以排除伪像。每条犬重复造影10次，每次间隔10分钟以上，所有图像储存于光盘中。体表放置电极同步监测心电图。 急性心肌缺血和再灌注犬心肌造影研究 动物准备：健康杂种犬u条，体重ZO。4．6 Kg，应用3％戊巴比妥钠静脉麻醉橱0mg／kg入双股静脉插管，一侧用于给药，另一侧用于输注造影剂。气管插管，呼吸机人工呼吸。于胸骨正中开胸，切开心包，悬吊于胸壁，制成心包吊篮。游离冠状动脉左前降支近端，在分出第一对角支后，穿线套扎阻断。4小时后松开左前降支套扎，对其进行再灌注。 心肌造影的方法（包括仪器与程序选择及造影剂注射方式和单次剂量）同正常心肌造影，触发间期从3：1开始，待造影剂在左室腔内达到充分显影后逐级递增至10叫：1，每一级触发采样2－3个。于冠状动脉阻断前半小时、阻断即刻、阻断后1小时在小时J小时／小时及再灌注后30分钟上小时、再灌注1／J’时注射双嚏达莫N．56m才kg，4分钟）后完成心肌造影。每一时间段心肌造影完成前进行实时二维超声心动图检查，观察室壁厚度及运动情况，所有图像储存于光盘中。体表放置电极同步监测心电图。 组织切片及病理检查 ·2· 应用氯化钾注射处死犬后取出心脏，处死前应用针头标记探头位置，于对应心肌造影采取的乳头肌水平将心脏横切成 0．5刁 厚片，放入二％氯化三苯四氮唆溶液（3℃水浴）中染色20分钟。取出染色的心脏短轴切片，应用三星数码相机p．1兆像素）摄片后放在10％福尔马林溶液中固定。分别在’IVI’C染色呈黄白色的梗死区、其周围对应于二维超声心动图上危险区但’ITC染色着砖红色的区域和下壁正常区域心肌组织取材块用石腊包埋，切片刀E染色，光镜下观察心肌病理改变。 资料分析 正常心肌造影分析 肉眼观察：采用半定量方法。选择峰值显影的图像。设定注射造影剂前的心肌回声为0级，心肌内可见稀疏的显影为1级，心肌内出现显著的显影2级，心肌内完全充满造影剂为：3级。 视频强度定量：选择峰值显影的图像，应用自制Matlab软件测量可得到不同触发间期任何部位局部心肌的视频密度值。测量前壁、前间壁＼间壁、下壁、后壁砸壁各区域平均视频密度及及减去本?