【摘 要】
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目的:从中性粒细胞(PMN)浸润及凋亡的角度,探讨中药清肠栓治疗溃疡性结肠炎(UC)急性期的作用机理。 方法:SD大鼠48只,分为正常组、模型组、清肠栓组和西药(SASP)组,每组各1
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目的:从中性粒细胞(PMN)浸润及凋亡的角度,探讨中药清肠栓治疗溃疡性结肠炎(UC)急性期的作用机理。
方法:SD大鼠48只,分为正常组、模型组、清肠栓组和西药(SASP)组,每组各12只。用三硝基苯磺酸(TNBS)诱导大鼠UC急性期模型。造模后第3天开始给药,连续给药7天后处死。记录病变结肠组织损伤指数;组织病理学及电镜观察结肠黏膜病理变化及PMN浸润情况:Elisa检测血清及结肠组织中的MPO、NE;Elisa、免疫组化、定量PCR检测结肠组织中的CINC-1及其受体CXCR2;分离病变部位结肠组织PMN,流式细胞术检测PMN凋亡率;免疫组化、定量PCR检测结肠组织中的Caspase-8,Caspase-9,GM-CSF,G-CSF。
结果:动物模型病理观察有大量炎症细胞浸润(以中性粒细胞和淋巴细胞为主);清肠栓组及西药组可见组织修复征象;血清中MPO含量各组没有统计学差异;血清中NE含量正常组与模型组比较无统计学差异(P>0.05);组织上清Elisa检测,模型组MPO及NE较正常组明显增高,清肠栓组和西药组较模型组降低(P<0.05);CINC-1定量分析及蛋白表达,模型组含量较正常组明显增高(P<0.05),清肠栓组和西药组较模型组均降低(P<0.05);CXCR2蛋白表达模型组较正常组及治疗组表达增高(P<0.05),清肠栓组和西药组较模型组均降低(P<0.05):CINC-1及CXCR2的mRNA表达量定量分析,模型组均较高于正常组(P<0.05),清肠栓及西药组CINC-1与模型组比较明显降低(P<0.05),CXCR2清肠栓模型组比较无差异(P>0.05);结肠组织晚期凋亡及坏死PMN的比例较大,各组间没有差异,早期凋亡的PMN清肠栓组较正常组减低(P<0.05);Caspase-8、Caspase-9、GM-CSF、G-CSF蛋白表达,模型组均较正常组升高(P<0.05),清肠栓及西药组均较模型组降低(P<0.05)。Caspase-8、GM-CSF、G-CSF mRNA定量PCR检测,模型组均较正常组明显增高(P<0.05),清肠栓组及西药组均较模型组减低(P<0.05),Caspase-9 mRNA各组间没有差异(P>0.05)。
结论:清肠栓对大鼠TNBS诱导的急性UC模型有治疗作用,能够减轻UC急性期结肠黏膜大量PMN浸润的状态,促进组织修复。清肠栓通过调节CINC-1/CXCR2的蛋白表达及mRNA基因表达,减少血液中的PMN向局部病变黏膜趋化及激活;通过调节MPO、NE的蛋白表达,减少这两种物质对组织的损伤;可以调节Caspase-8、Caspase-9、GM-CSF、G-CSF的蛋白及基因表达,可能对UC急性期PMN凋亡产生影响。
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