骨碎补来源于水龙骨科植物槲蕨Drynaria fortunei(Kunze)J.sm.的干燥根茎,是我国古代中医治病运用历史较为久远的一味中药,始载于《本草拾遗》,疗效可靠,一直被历代医家所推崇并沿用至今,是《中国药典》收载的中药品种。骨碎补具有补肾、活血、止血、续伤之功效,用于治疗肾虚腰痛,耳鸣耳聋,牙齿松动,跌扑闪挫,筋骨折伤,外治斑秃,白癜风等疾病。现代药理实验研究表明,骨碎补针对骨关节病变、耳蜗毒性、骨骼发育等症具有明显的药理活性,证明骨碎补是一应用广泛、市场前景广阔、经济价值高的药材。随着大量中药的开发利用,药材品种混乱给中药安全使用造成极大隐患。骨碎补是常用中药,长期以来,由于骨碎补及其混淆品性状、功效相似以及地区性习惯用药等原因,骨碎补与其混淆品混用的现象较多,药材的品种比较混乱。目前,关于骨碎补及其混淆品的鉴别研究报道较少,且研究多集中在性状、显微两方面,未见关于骨碎补及其混淆品鉴别的系统研究,这将制约骨碎补的药材质量和开发利用。因此,本课题将对骨碎补及其混淆品进行系统的生药学研究,并建立DNA条形码。本文对骨碎补及其混淆品进行了系统的生药学研究。1.基原鉴定:通过调查确定骨碎补及其混淆品的来源;2.性状鉴定:通过观察其外观形态,总结其性状主要特征;3.显微鉴定:观察其鳞叶和横切面显微特征,总结其鳞叶形态特征和横切面维管束排列方式;4.理化鉴定:改良了骨碎补中柚皮苷的薄层鉴别方法,建立了混淆品崖姜中原儿茶酸的薄层鉴别方法,结合两个薄层色谱结果,可将骨碎补与其混淆品区分;采用HPLC法对骨碎补中柚皮苷进行了含量测定,结果显示柚皮苷浓度在5.01~86.14μg/m L范围内,柚皮苷浓度与峰面积呈良好的线性关系;采用液相色谱法(HPLC)建立了骨碎补的特征图谱,将骨碎补特征图谱与三种骨碎补混淆品的HPLC色谱图进行比较,色谱行为有明显差别,可达到区分骨碎补及其混淆品的目的。5.分子生物鉴定:主要探讨基于psbA-trn H片段叶绿体基因组序列,考察不同物种之间的亲缘关系,建立了骨碎补及其混淆品的DNA条形码。实验结果提供了骨碎补的内在分子信息,是传统生药学鉴定方法的有效补充。本文从五大鉴定出发,完成了骨碎补的特征图谱研究,建立了骨碎补及其混淆品的DNA条形码,完善了骨碎补及其混淆品鉴别的系统研究,丰富了骨碎补的检验方法,解决了实际市场流通中对骨碎补真伪优劣鉴别技术落后的问题。同时,本文为骨碎补的生药学研究提供了新思路,为提高骨碎补的质量控制标准奠定了基础。