N-乙酰氨基葡萄糖转移酶Ⅲ (GnT-Ⅲ)是一种特殊的糖基转移酶,它能够催化生成N-聚糖核心β1,4甘露糖上的平分型乙酰氨基葡萄糖,抑制N-聚糖合成过程中其他糖基转移酶的作用,从而调控N-聚糖结构,影响糖蛋白的功能。本项目前期以引进具有活性的Mu转座子材料与玉米B73自交系杂交,得到大量插入诱变M1和M2群体,利用优化的热不对称PCR技术扩增其基因组DNA,找到差异片段,即为Mu转座子插入部分基因片段。分析靶位点侧翼序列,筛选与玉米重要农艺性状相关的基因,结果显示GnT Ⅲ基因突变与玉米白化苗的表型关系密切。为进一步探讨GnnTⅢ因与植物体内叶绿素含量的关系,本实验克隆了玉米品种B73中的GnT-Ⅲ基因,应用Gateway系统将GnT-Ⅲ基因连接植物表达载体pMDC45/46/47/83/84/85,使用蘸花法转入野生型拟南芥。利用潮霉素抗性对获得的转基因株系进行筛选,最终获得T3代转基因株系46,47,83,84。分子水平上鉴定GnT-Ⅲ基因整合到野生型拟南芥基因组中；Westblot blot表明该蛋白在转基因株系46,83中明显表达；应用荧光显微镜观察叶片和根系绿色荧光,表明该融合蛋白可能定位在叶片和根系的细胞膜上。与野生型拟南芥相比,转基因株系46,83叶片数目较多,叶片较大,根系粗壮,根长较长,侧根数目较多；在同样的生长条件下,转基因株系46,83的叶片,特别是主茎上的叶片呈现椭圆形,不同于野生型的长圆形,而且转基因株系46,83叶片的表皮毛更多。另外,与野生型相比,转基因株系46的叶绿素a,叶绿素b和总叶绿素含量均呈现出极显著性差异,而转基因株系83只在叶绿素b和总叶绿素含量有显著性差异,这些结果表明超表达玉米GnT Ⅲ基因对拟南芥生长产生影响,并大幅提高幼苗的叶绿素含量,对光合作用有一定的促进作用。