论文部分内容阅读
目的: 通过研究以补肾健脾养血活血法为组方原则的康欣口服液对Balb/c小鼠脑线粒体DNA(以下称mtDNA)缺失突变的影响,从分子水平揭示康欣口服液延缓衰老的机理,为中医药抗衰老新药的研发提供理论基础。 方法: 1 近交系Balb/c小鼠,分为青年组(6周),中年组(6个月),老年组(14个月)各10只,取其脑组织,提取小鼠脑组织的mtDNA,采用聚合酶链反应(以下称PCR)技术扩增缺失型的mtDNA片段(304bp),以证实老年组小鼠脑组织中存在mtDNA缺失。 2 近交系Balb/c老年小鼠分别灌胃给予生理盐水(老年空白对照组),康欣口服液(老年康欣口服液组),连续四个月后处死,取其脑组织。 3 提取近交系Balb/c老年小鼠脑组织的mtDNA,采用PCR技术分别扩增野生型的mtDNA片段(472bp)和缺失型的mtDNA片段(304bp),电泳后,运用凝胶成像仪进行光密度扫描,比较老年空白对照组与老年康欣口服液组缺失型mtDNA/野生型mtDNA的光密度比值。 结果: 1 近交系老年Balb/c小鼠脑mtDNA中存在明显的片段缺失,而在中年Balb/c小鼠与青年Balb/c小鼠脑mtDNA中未检测到相同片段的缺失。 2 与老年空白对照组相比,康欣口服液能显著降低老年Balb/c小鼠mtDNA的缺失率(P<0.001),提示补肾健脾养血活血法方药能减少mtDNA的氧化损伤,对mtDNA有保护作用。 结论: 1 mtDNA的缺失突变随年龄而积累,在老年小鼠的脑mtDNA中可以检测到。 2 康欣口服液可以抑制老年小鼠脑mtDNA的缺失,提示补肾健脾养血活血法方药能减少mtDNA的氧化损伤,对mtDNA有保护作用,从而从分子水平揭示补肾健脾养血活血法抗衰老机理。