论文部分内容阅读
玉米疯顶病(Crazy top)是由大孢指疫霉(Sclerophthora macrospora(Sacc.)Thirum.,Shaw et Naras)引起的一种具有毁灭性的玉米霜霉病病害。本试验基于1996年至2003年课题组对玉米疯顶病研究所获得的结果与进展,开展了病原菌的常规检测和分子检测、病害的诱发及防治方面的研究: 1.采用I2-ZnCl2染色、苯胺蓝染色、棉蓝乳酚油染色、MTT染色等四种染色法检测不同时期玉米病组织及病田中病株种子、正常株种子中的带菌状况、带菌部位、病菌的存活能力。四种染色剂均能够将病原菌卵孢子特异性地染色并同植物组织结构明显地区分开,达到快速的检测目的。其中I2-ZnCl2染色方法能观察到被染成橘红色或紫红色的鹿角状菌丝体、吸器以及雄器,具有对卵菌特异性染色特点,能够有效将大孢指疫霉菌丝体与其它常见真菌的菌丝体加以区别。 2.通过建立有效的提取微量DNA的方法,并利用通用引物ITS1/ITS4和卵菌特性引物DC6/ITS4进行套式PCR,获得一个约900bp的片段,片段克隆测序后,经在NCBI数据库中的BLAST比对,进行序列相似性分析,结果所测得序列同大豆疫霉菌和葡萄霜霉菌都存在非常高的相似性,可以确认为卵菌,但暂时还无法认定该片段即是大孢指疫霉,需要进一步的重复实验。若结果肯定,预计可以设计特异性引物建立大孢指疫霉的分子检测程序。 3.在温室以不同的接种处理并采取苗期水淹的方式进行了玉米疯顶病的诱发试验,研究病田土壤、病残体、病株果穗种子在病害传播中的作用,以及病害诱发的环境因素。结果表明,人工诱发玉米疯顶病尚存在一些困难,卵孢子的萌发条件还未掌握。在田间,采取播种后至苗期多次淹水的方式,成功诱发了病害,感病品种的发病率达到45%以上。利用种衣剂甲霜灵锰锌和杀毒矾对种子进行包衣处理,在病害的药剂防治方面取得了一定效果,但距高效防治还有距离。 通过对玉米疯顶病病原菌检测技术和病害防治技术的研究,为病原快速鉴定、致病规律研究、病害流行传播、人工诱发及田间防治积研究积累了经验并奠定了基础。目前人们对疯顶病的认识还十分有限,仍有许多问题有待深入研究。