膀胱尿路上皮细胞癌微卫星不稳定性及其临床意义

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目的 运用聚合酶链反应(PCR)技术分析D9S54、D9S162、D9S747、IFN-A1四个微卫星位点在膀胱尿路上皮细胞癌(UCC)肿瘤组织和尿沉渣肿瘤细胞中的变化,探讨这四个高频位点的微卫星不稳定性(MSI)与膀胱UCC生物学行为的关系,并与目前常用的尿细胞学检查相比较,探讨膀胱UCC早期诊断和监测复发的简单有效方法。 方法 收集44例初发UCC患者肿瘤组织和10例无肿瘤的膀胱组织及对应患者的外周静脉血、尿液标本,UCC患者经病理科HE染色切片明确诊断,依据CT结合膀胱镜检查对肿瘤进行TNM分期,依据WHO标准判定病理分级。Ta-T1期24例,T2期以上20例;G1-G2级20例,G3级24例。随访3~16个月,随访期间14例复发患者再次取尿沉渣和外周血标本。 对以上标本进行MSI检测。采用经典的酚—氯仿抽提法提取样本DNA,在15μL反应体系中进行PCR扩增,扩增产物以1.8%琼脂糖凝胶进行电泳。以外周血淋巴细胞DNA的PCR扩增产物作为参照,肿瘤组织及尿沉渣标本的扩增产物在相邻条带上于同一条件下进行电泳,等位基因电泳条带的位置改变或出现额外条带即判定为微卫星不稳定。2个或2个以上位点出现MSI判定为MSI-H,一个位点出现MSI判定为MSI-L,无MSI记为MSS。 同时对44例初发患者进行尿细胞学检查,采用巴氏分级,三级以上为阳性。 采用stata 7.0统计软件进行X~2检验,比较各组MSI或尿细胞学检出率之间的差异。
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