兔骨髓间充质干细胞与髓核细胞共同培养后对髓核细胞的影响

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目的:将兔骨髓间充质干细胞(bone marrow-derived mesenchymalstem cells,BMSCs)与髓核(nucleus pulposus,NP)细胞共同培养,通过观测其对髓核样细胞增殖能力的影响,探讨其作为体外大量培养髓核样细胞方法的可行性。方法::分别分离乳兔BMSCs和NP细胞,将BMSCs传代后取第三代与原代NP细胞分组共同培养,按NP细胞与BMSCs比例的不同分组:A组为NP对照组(全为NP细胞),B组为BMSCs对照组(全为BMSCs),C组NP细胞与BMSCs比例为3:1,D组比例为2:1,E组比例为1:1,F组比例为1:2,G组比例为1:3。对共同培养后各组细胞进行细胞计数,了解其增殖情况,并对各组细胞进行Ⅱ型胶原染色,计算阳性细胞百分比,观察培养前后阳性细胞的改变。结果:NP细胞与BMSCs共同培养后,A组细胞数低于B~G组(P<0.01);B组低于C~G组(P<0.01);C组高于E,F,G组(P<0.01),但于D组无显著性差异(P>0.05);E组高于F,G组(P<0.01);F组高于G组(P<0.01)。Ⅱ型胶原染色后,A组细胞呈阳性,B组细胞呈阴性,其余各组阳性细胞与阴性细胞共存,其中C组共同培养前后的阳性细胞增长高于E,F,G组(P<0.01),而与D组无显著性差异;E组阳性细胞增长高于F组(P<0.01);F组高于G组(P<0.01)。结论:兔BMSCs与兔NP细胞共同培养后,能促进髓核样细胞的增殖;在NP细胞与BMSCs比例为1:3至2:1之间时,髓核样细胞的增长随着其比例的增加而降低;当NP细胞与BMSCs比例为2:1与3:1时,髓核样细胞增长量与细胞比例无明显关系。
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