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目的：探讨PI3K/AKT信号通路抑制剂LY294002在神经母细胞瘤SK-N-SH细胞多药耐药中的作用。方法：①将神经母细胞瘤SK-N-SH细胞在体外含10%FBS血清的DMEM培养液中培养，于对数生长期将贴壁达90%的细胞用0.25%胰酶消化，以（1～5）×105/ml接种于96孔培养板，24h后，分别用不同浓度的LY294002、顺铂（CP）、依托泊甙（VP16）、顺铂+依托泊甙（CP+VP16）、拓扑替康（TPT）干预细胞，48h后，MTT法检测不同处理组细胞的OD值，计算各化疗药物的半数抑制浓度（IC50）作为下一步的实验浓度。(CP+VP16）组利用CompuSyn software软件计算IC50条件下单药剂量。②体外培养人神经母细胞瘤SK-N-SH细胞，于对数生长期将贴壁达90%的细胞0.25%胰酶消化传代至10个75ml培养瓶，分为以下10组：A组：LY294002组，B组：CP组，C组：VP16组，D组：TPT组，E组：CP+VP16组，F组：LY294002+CP组，G组：LY294002+VP16组，H组：LY294002+TPT组，I组：LY294002+CP+VP16组，J组：空白对照组。24h后加入IC50浓度的化疗药，LY294002联合化疗药物组分别用浓度为3μM及20μM的LY294002预先处理2小时，再加入IC50浓度的化疗药,空白组不给予任何处理。48h后，提取所有干预组细胞的总RNA，通过荧光定量PCR法检测各组细胞MDR1mRNA表达量。结果：①MTT法显示5μM的LY294002、5μM的CP、1μM的VP16、20μM的TPT、5μM的（CP+VP16）作用SK-N-SH细胞48h后，细胞存活率小于对应的阴性对照组（P＜0.05）。由于IC50下细胞既有存活又有死亡，使用GraphPad Prism5软件计算化疗药的IC50作为下一步实验浓度。48h CP IC50为50μM，VP16为50μM，TPT为60μM，(CP+VP16)组（1：1）浓度分别为26μM。LY294002的IC50为15.6μM，分别选用3μM及20μM的浓度作为下一步的干预浓度。②48h后荧光定量PCR显示，当LY294002（LY）浓度为3μM时，MDR1基因mRNA表达较空白组无明显改变（P＞0.05），（LY+CP）组、（LY+VP16）组、（LY+CP+VP16）组MDR1mRNA明显低于CP组（P＜0.05）、VP组及（CP+VP16）组（P＜0.01）；（LY+TPT）组则明显高于TPT组（P＜0.01）；当LY浓度为20μM时，其MDR1mRNA表达较空白组显著下降（P＜0.01），CP组、VP16组、（CP+VP16）组细胞的MDR1mRNA均明显高于抑制剂联合化疗药组（P＜0.05），TPT组较（LY+TPT）组无明显改变（P＞0.05）。结论：LY294002可降低SK-N-SH细胞体外增殖及多药耐药，可以逆转顺铂、依托泊甙的耐药，降低拓扑替康的耐药。PI3K/AKT信号通路可能是介导神经母细胞瘤细胞化疗药物顺铂、依托泊甙耐药的主要作用机制之一，并参与拓扑替康的耐药机制。