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植物内生真菌以其独特的代谢方式,能产生结构新颖、具有多种生物活性的的化合物,成为近年来研究陆生微生物的热点。广豆根(Sophora tonkinensis),属于豆科槐属,是广西特色药用植物,主要分布在我国西南部地区,具有清热解毒,消肿止痛等功效。本论文以2株广豆根内生真菌GDG-102(Xylaria sp.)和GDG-178(F.equiseti)为研究对象,以抗菌活性筛选为指导,对其次级代谢产物进行研究,以期从中发现具有抗菌活性的化合物,从而为植物内生真菌中抗菌活性天然产物的研究提供科学参考。本论文主要包括以下5个方面:1.介绍植物内生真菌中炭角菌属(Xylaria sp.)和镰刀菌属(F.equiseti)次级代谢产物的研究概况。2.广豆根内生真菌分离及抗菌活性初筛。通过组织切片法,从广豆根的根、茎、叶中分离得到153株内生真菌,并从中筛选出51株内生真菌进行抗菌活性初筛。研究结果表明广豆根内生真菌中含有大量抗菌活性的成分。3.广豆根内生真菌GDG-102(Xylaria sp.)次级代谢产物化学成分研究。通过发酵培养,结合常规正相硅胶柱层析、反相硅胶柱层析、葡聚糖凝胶Sephadex LH-20柱层析、重结晶、以及半制备高效液相HPLC等多种分离手段,对GDG-102的次级代谢产物进行分离纯化,从中得到10个化合物,通过波谱分析(质谱、核磁以及X-单晶衍射等)确定化合物结构,分别为:xylarphthalide A(102-1),(-)-5-carboxylmellein(102-2),(-)-5-methylmellein(102-3),cytochalasin K(102-4),cytochalasin E(102-5),6-hepanoyl-4-methoxy-2H-pyran-2-one(102-6),dihydrosporothriolide(102-7),2-butyl-3-methyl succinic acid(102-8),(22E)-ergosta-7,22-diene-3β,5α,6β-triol(102-9)和 ergosterol peroxide(102-10)。其中化合物102-1和102-6通过SCIFINDER检索,确认为新化合物,化合物102-1的绝对构型通过X-单晶衍射得到证实。4.广豆根内生真菌GDG-178(F.equiseti)次级代谢产物化学成分研究。通过发酵培养,采用各种色谱方法对其代谢产物进行分离纯化,从中得到11个化合物,再通过波谱方法确定化合物的结构,分别为:stcrigmatocysin(178-1),crgosterol(178-2),pxisterigmatocystin D(178-3),5-methoxvdihvdrostcrigmatocysin(178-4),aversin(178-5),averythrin(178-6),6,8-di-O-methyl averufin(178-7),5-methoxysterigmatocysin(178-8),6,8-di-O-methylnirufin(178-9),emodin(178-10)和 versicamidesA(178-11)。其中,化合物 178-1、178-3、178-4、178-5、178-6、178-7、178-8、178-9和178-11为首次报道从镰刀菌属中分离得到。5.微量二倍稀释法测定化合物的抗菌活性。通过微量二倍稀释法测定分离得到的化合物抗菌活性。实验结果表明,化合物大多显示出较好的抑菌作用。在内生真菌GDG-102代谢产物中,异香豆素类化合物102-1、102-2和102-3对枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、痢疾志贺氏菌和大肠杆菌显示较好的抑菌活性,MIC值均在12.5 μg/mL~25 μg/mL;细胞松弛素类化合物102-4和102-5对金黄色葡萄球菌、炭疽杆菌、痢疾志贺氏菌和大肠杆菌也显示较好的抑菌作用,MIC值在12.5μg/mL-25 μg/mL。在内生真菌 GDG-178 代谢产物中,178-1、178-3、178-5、178-6、178-7、178-8 和 178-11 对枯草芽孢杆菌,178-3、178-4、178-6、178-8 和 178-11对巨大芽孢杆菌,178-6对痢疾志贺氏菌分别显示出较强的抑菌活性(MIC值均为6.25 μg/mL);178-1和178-6对大肠杆菌具有非常好的抑菌效果,其MIC值为3.125μg/mL,与阳性药相当。