本课题选用8981基因为目的基因,通过农杆菌转化法将目的基因转入植物基因组中,本课题主要进行后期鉴定,利用除草剂、PCR、生理筛选、Southern杂交以及Tail-PCR等技术,最终获得能够稳定遗传的转基因旱稻新品系。具体研究结果有以下几点:(1)候选纯合株系的筛选在试验田采用浓度为0.8mg/mL的草铵膦进行喷洒,筛选出97个具有抗除草剂的抗性株系进行PCR鉴定,筛选出候选纯合株系93个,杂合株系4个。(2)抗性株系鉴定及突变体筛选将筛选出的93个候选纯合株系,通过NaCl胁迫后得到8个比野生型耐盐性强的株系、PEG胁迫后得到7个比野生型抗旱性强的株系、极限实验筛选出高抗除草剂的株系93个以及目前最高的除草剂耐受浓度8mg/mL;并获得了具有特殊农艺性状的矮杆株系6个以及籽粒饱满的株系33个。(3)Southern杂交分析本实验采用地高辛试剂盒进行Southern杂交,从25个株系中筛选出了能够稳定遗传的单拷贝转基因株系2个;二拷贝转基因株系12个;多拷贝转基因株系11个。(4)TAIL-PCR分析目的基因的插入位点将得到的能够稳定遗传的2个单拷贝转基因株系2-9-5、2-19-5分别进行TAIL-PCR鉴定,确定了株系2-9-5目的基因的插入位点在10号染色体Os10g0351500基因中,此基因编码Tyrosine protein;株系2-19-5目的基因的插入位点在1号染色体Os01g0884300基因中,此基因编码NAW protein。