P-CREB1在七氟烷对不同性别成年大鼠学习记忆影响中的作用

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目的:   观察吸入七氟烷对不同性别成年大鼠学习记忆的影响,和对海马神经元p-CREB1蛋白及其介导转录的凋亡蛋白表达的影响,探讨七氟烷对成年大鼠学习记忆损害的可能机制。   方法:   健康成年SD大鼠64只,经开放实验、避暗实验及Morris水迷宫行为学筛选出58只,随机分为4组:雌性对照组(Fc组,n=15)、雌性七氟烷组(Fs组,n=15)、雄性对照组(Mc组,n=14)和雄性七氟烷组(Ms组,n=14)。Fs组和Ms组吸入3%七氟烷2h,Fc组和Mc组吸入95%氧气2h。分别在停止给药后1、30、60、90d进行自发活动实验;停止给药后2、30、60、90d进行避暗实验;停止给药后3~7d、31~35d、61~65d和91~95d进行Morris水迷宫实验。Westen blot法分别检测Morris水迷宫结束后第7d和第95d海马神经元p-CREB1、Bcl-2、Caspase-8和Caspase-3的表达水平。   结果:   开放实验:停止吸入七氟烷后1d,与Fc组比较,Fs组活动总路程减少,平均速度减慢(P<0.05);与Mc组比较,Ms组活动总路程减少,平均速度减慢。   避暗实验:各组间潜伏期及错误次数相互比较,差异无统计学意义(P>0.05)   Morris水迷宫实验:与Fc组比较,Fs组在停止吸入七氟烷后第1d和第31d时游泳总路程增加,逃避潜伏期延长(P<0.05);与Mc组比较,Ms组在停止吸入七氟烷后第3~6、31~34、61d时游泳总路程增加,逃避潜伏期延长(P<0.05);与Fs组比较,Ms组在停止吸入七氟烷后第4~6、34d时游泳总路程增加,逃避潜伏期延长(P<0.05)。   Western blot结果:停止吸入3%七氟烷2h后第7d,与Fc组比较,Fs组p-CREB1和Bcl-2蛋白表达下调,Caspase-8及Caspase-3表达上调(P<0.05);与Mc组比较,Ms组p-CREB1和Bcl-2表达下调,Caspase-8及Caspase-3表达上调(P<0.05);与Fs组比较,Ms组p-CREB1和Bcl-2表达下调(P<0.05)。停止吸入七氟烷后第95d,p-CREB1、Bcl-2、Caspase-8和Caspase-3的表达水平差异无统计学意义。   结论:   吸入3%七氟烷2h可致成年雌性大鼠31d内,雄性大鼠62d内学习记忆损害,且对大鼠的学习记忆具有可逆性影响。其损害机制可能与抑制成年大鼠海马神经元p-CREB1蛋白表达,引起下游蛋白Bcl-2蛋白表达下降,Caspase-8蛋白和Caspase-3蛋白表达上调,促进海马神经元凋亡有关。
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