薄层色谱结合图像处理技术在中药质量分析中的应用研究——三七(片)的指纹色谱鉴别及三黄片中盐酸小檗碱的快速定量分析

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薄层色谱法具有操作方便的、分离效率高、专属性好、分析速度快等优点,被广泛应用于化学药品、抗生素、中药材、中成药及其制剂的鉴别及含量测定。但薄层色谱在鉴别中的量化分析、定量测定等研究均需要借助于专业的薄层扫描仪,这给薄层色谱应用的深度和广度带来较大的限制。GOODSEE-20E薄层定量系统为一数字化图像处理软件,它可以通过处理平面色谱的数码图像实现定性定量分析。本课题主要研究薄层色谱结合数字化图像处理技术在三七(片)的指纹色谱鉴别及三黄片中盐酸小檗碱快速测定中的应用。   第一部分以高效硅胶G-GL薄层板,配合SQ展开剂,展开8~9cm,10%硫酸乙醇溶液显色,建立分离三七中人参皂苷Rb1、人参皂苷Re、三七皂甙R1、人参皂苷Rg1等的TLC方法,突出了特征成分三七皂苷R1的分离,提高了色谱的专属性;以上述TLC平面色谱为基础,用图像处理软件转化,建立了三七薄层色谱的轮廓指纹谱,通过数据量化处理,以主成分分析法对三七(片)的指纹色谱进行分析,得到了满意的鉴别结果。薄层平面色谱经过数字化处理转化为轮廓图谱,克服了平面薄层色谱相互之间难以量化比较的不足,改善了平面薄层色谱信息的可比性,经过数据分析,可量化评价薄层色谱之间的接近程度和差异程度,大大增强了薄层色谱在药品质量分析中评价意义。   第二部分以盐酸-乙醇(1:100)为提取溶剂,按薄层色谱法用硅胶G预制薄层板,乙酸乙酯-乙醇-甲酸(7:1:2)为展开剂,展距8~9cm,数码相机在紫外光灯(366nm)下采集色谱图片,以GOODSEE-20E薄层定量系统处理数据并计算含量。结果盐酸小檗碱在0.01~0.06μg范围内具有较好的线性关系,回归方程:Y=1.94X×104+7×102,r=0.9941,平均回收率为100.7%(n=6)。可以用于三黄片中盐酸小檗碱的快速测定。该方法操作简便、经济、快速、专属性强。同时建立了薄层荧光扫描法测定三黄片中盐酸小檗碱的含量,并比较两种方法的测定结果。虽然本方法在准确度、精密度等方面不及经典的薄层扫描法,但在特定的场合如药品的现场快速筛查时,或在缺少薄层扫描仪的情况下可以用于三黄片中盐酸小檗碱的初步测定。
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