黄颡鱼的转录组分析以及p15PAF在斑马鱼胚胎发育中的功能研究

来源 :华中农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:Xusian
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
在鱼类中,雌雄生长异型模式有着重要的理论和实践意义。由Y、X特异等位基因标记所支持的性别控制技术已经应用于全雄黄颡鱼品系的大规模育种,但黄颡鱼遗传育种的遗传信息仍不太明确。在此,我们首次对来自XX雌鱼、XY和YY雄鱼的多种组织进行了全转录组分析。总共获得1,202,933个高质量reads(约540Mbp),并拼接成为28,297个contigs和141,951个singletons。通过使用BLASTX与NCBI nr数据库的比对,获得了总共52,564个unique sequences,其中包括18,748个contigs和33,816个singletons,并能与25,669个已知的或预测的蛋白相比对。这些被注释的序列经过GO数据库分析,其中有712个可被注释到生殖与繁殖过程的条目中。并通过KEGG富集分析发现了一些与生殖系统潜在相关的基因,预测到了至少21个性别决定与分化潜在相关基因,例如Dmrt1、Sox9a/b、Cyp19b、WT1、AMH。从转录组数据中还获得了总共82,794个SSRs、26,450个SNPs、和4,145个INDELs。因此,我们的转录组分析为黄颡鱼的性别控制育种提供了有意义的研究,并有利于将来硬骨鱼类的生殖与性别决定研究。通过对转录组测序数据的荧光定量PCR分析发现,与肿瘤发生和细胞增殖密切相关的增殖细胞核抗原(PCNA)相关因子p15PAF在黄颡鱼XX雌鱼卵巢中的表达量显著高于XY雄鱼精巢中的表达量。然而,p15PAF在脊椎动物发育中的功能仍是未知。为了探索p15PAF在斑马鱼发育中的作用,我们使用CRISPR/Cas9技术构建了p15PAF突变体斑马鱼。我们发现缺失母源p15PAF的突变体(即p15PAF母源突变体)会在早期胚胎发育时期出现严重缺陷,包括由一些早期胚胎腹背轴分化相关标记基因减少或者异位所指示的体轴形成异常。值得注意的是,p15PAF母源突变体在母源-合子转换(MZT)期间,正常的母源因子降解和合子基因激活被严重影响,Wnt/β-catenin信号通路中的一些基因表达量下调。而p15PAF母源突变体的腹背轴分化缺陷可以由过表达的β-catenin所挽救。TOPFlash荧光素酶报告实验可以用来检测Wnt/β-catenin信号通路中TCF/LEF的活性,结果表明p15PAF和β-catenin配合调节下游基因。免疫共沉淀实验证明了斑马鱼的P15PAF蛋白可以和β-catenin蛋白相互结合。总之,我们的结果揭示了斑马鱼p15PAF结合β-catenin并且调节β-catenin的活性,并在包括MZT和体轴形成的早期胚胎发育过程中发挥关键作用。
其他文献
随着社会的发展,曾今广泛普及的电子电气产品如今大多已进入淘汰报废期,与此同时,随着经济发展速度不断加快以及科技不断进步,电子电气产品的更换周期不断缩短,由此便会产生
普通话的进行体一般用时间副词"在、正在"来表示,持续体一般用"着"来表示。玉林方言的进行体主要用动态助词"住(紧)"和时间副词"在"来表示,而持续体则主要用句尾助词"在"来表
西部是我国少数民族聚集地,这里曾经水草丰盛,林木繁茂。但是长期以来,由于为了发展经济、当地居民环保意识低、以及立法不足等原因,使西部地区的生态环境不断恶化。自从我国
目的:分析临床治疗不稳定心绞痛患者的效果。方法:选择2015年12月到2016年12月在我院治疗的患者74例,依据治疗方式分成治疗组和参照组,各组患者37例,参照组患者采取常规方式治疗,治
该文利用遥感与地理信息系统技术研究北京平原区农用地内部粮田、菜地和林地三大类农地利用类型的变化。结果表明:2004年至2014年这10 a间,粮田转变为林地与菜地是北京平原区
在科技快速发展的推动下,汽车行业制造技术也在不断地向前发展着,一些汽车新技术应运而生,正在逐渐改变着汽车行业发展趋势。为了进一步提高汽车技术水平,推动汽车行业健康持
为了提高鸡肉糜制品的品质,优化加工工艺,把TG酶添加到肉糜制品中,然后经超高压处理,经过二段加热形成凝胶,测定其质构特性和保水率。结果表明,酶活度、压强和保压时间对鸡肉
目的:探讨终止瘢痕子宫6—10周妊娠的最佳手术方式。方法:回顾性分析自愿要求终止妊娠瘢痕子宫患者36例临床资料,均使用米非司酮配伍米索前列醇后行人工流产术。结果:由于药物的
目的探讨老年肺炎克雷伯菌所致肺部感染患者临床耐药情况。方法指定具有专业知识及丰富经验的临床实验室检验人员对87例因肺炎克雷伯菌所致肺部感染的老年患者进行耐药性检验
1.问题的提出 1 自从乌瓦申1927年提出“形态音位”,特鲁别茨科伊1929年提出形态音位学以来,学术界一直意见纷纭,莫衷一是,令人觉得这些语言现象犹如一团理不清的乱麻。有人