【摘 要】
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本文对转谷氨酰胺酶的分离纯化、分子修饰(制备交联酶晶体)、酶晶体的固定化及各部分酶学性质进行了研究。对购买的转谷氨酰胺酶,通过乙醇沉淀、盐析、超滤、凝胶层析4步纯化,最终获得电泳纯的酶。以酶活力为指标,对转谷氨酰胺酶的分离纯化条件进行了研究,研究结果为：硫酸铵饱和度选为65%时可以将酶蛋白完全沉淀出来,超滤压强为0.2MPa时可以通过超滤膜截留80.2%的酶蛋白,Sephadex G-100层析的
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本文对转谷氨酰胺酶的分离纯化、分子修饰(制备交联酶晶体)、酶晶体的固定化及各部分酶学性质进行了研究。对购买的转谷氨酰胺酶,通过乙醇沉淀、盐析、超滤、凝胶层析4步纯化,最终获得电泳纯的酶。以酶活力为指标,对转谷氨酰胺酶的分离纯化条件进行了研究,研究结果为：硫酸铵饱和度选为65%时可以将酶蛋白完全沉淀出来,超滤压强为0.2MPa时可以通过超滤膜截留80.2%的酶蛋白,Sephadex G-100层析的洗脱流速为1mL/min,洗脱60min后可收集到酶活力较高的酶液。经测定纯化后转谷氨酰胺酶：酶
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在利用绛红小单胞菌(Micromonospora purpura)发酵产小诺霉素(Micronomicin,MCR)的工业化生产中,一直存在发酵液生物效价低,发酵液中小诺霉素组份低的问题。针对这一实际情况,本文从影响小诺霉素发酵的氨基酸前体,微量金属离子,发酵调节剂,蛋白酶预处理发酵培养基四个方面进行了实验探讨。主要研究工作和结果如下：(1)分别在发酵培养基中加入一定配比的甘氨酸、赖氨酸、谷氨酸、
异丁香酚甲醚是一种重要的合成香精,是香石竹、玫瑰、紫丁香、依兰等花香型香精中重要的香原料,广泛用于日化香精、食用香精和烟用香精。本文以丁香酚为起始原料,碳酸二甲酯为甲基化试剂,首先通过亲核取代反应合成丁香酚甲醚,再在碱性条件下催化异构合成异丁香酚甲醚。采用液相间歇式反应合成丁香酚甲醚,考察不同类型固体碱催化剂的催化活性,确定KF为适宜的催化剂。以KF为催化剂,通过正交实验,得出合成丁香酚甲醚的最佳
本论文优化了米根霉脂肪酶基因工程菌在摇瓶中的产酶条件,并将其在10L发酵罐中扩大培养,探讨了该菌的高密度培养及诱导产酶条件,包括对脂肪酶基因工程菌的接种量和甲醇补料策略的研究,解决了产酶过程中蛋白降解的问题,并对已克隆的米根霉脂肪酶基因进行了定点突变研究。主要结果如下：1、在摇瓶培养中,脂肪酶基因工程菌在培养基初始pH6.0、甲醇添加量1%、诱导时间96 h、诱导温度为30℃产酶最佳。采用2%的玉
普鲁兰酶(Pullulanase,EC.3.2.1.41)是脱支酶的一种,它能专一性水解普鲁兰多糖和支链淀粉分支点上的α-1,6糖苷键,在淀粉糖化工业中具有广阔的应用前景。本实验分离纯化了嗜热脂肪芽孢杆菌中的普鲁兰酶。嗜热脂肪芽孢杆菌经细胞破碎机破壁后,采用硫酸铵盐析法除杂蛋白,DEAE-32阴离子交换纤维素纯化胞内普鲁兰酶。通过L_9(3~4)正交试验优化了盐析除杂蛋白工艺条件。结果表明:菌体与
以丙烯酸全氟烷基乙酯(FA),甲基丙烯酸缩水甘油酯(GMA),苯乙烯(St)为原料,采用自由基乳液法制备出带有环氧基团的三元无规共聚物,考察了单体投料比对共聚物组成的影响。通过溶液共混法将制备的三元含氟共聚物用于环氧涂料的改性,考察了共聚物加入量、溶剂种类及用量对涂层疏水性能的影响,制备了具有优异疏水性能的高性能环氧涂料。通过对5种不同种类环氧涂料改性,结果发现改性后涂层的疏水性均得到了不同程度的
磷脂酶D (PLD; EC 3.1.4.4)可催化磷脂水解为磷脂酸,同时还可催化自然界中含量丰富的磷脂酸胆碱转酯为自然界中含量稀少甚至不存在的磷脂或磷脂衍生物。该转酯反应对于合成稀有天然磷脂组分及人工合成磷脂具有不可替代的优势。到目前为止,不少生产PLD的菌株已经被成功分离出来。但对于工业化生产来讲,获取更多性能稳定的酶源是必要的。本文从北京昌平美亚斯磷脂厂园区土壤内筛选出了5个生产PLD的放线菌
3-羟基丙酸(3-HP)是一种重要的平台化合物,其产量直接影响着许多高附加值化学品的生产。本文以肺炎克雷伯氏菌(Klebsiella pneumoniae)作为宿主,是因为它具有天然的甘油歧化途径,完整的dha调节酶系,并且可耐受高浓度甘油。通过代谢途径的优化,构建了兼具甘油合成及3-羟基丙酸合成的重组菌,既改善了菌体代谢过程中的辅酶平衡,又实现了3-羟基丙酸的高产。本文克隆了酿酒酵母甘油合成的关
透明质酸(HA)是广泛存在于人和动物组织中的天然粘多糖,具有独特的保湿性、流变性和生物相容性,在医疗等领域有着广泛的应用。实际应用发现,天然HA在组织中易扩散,易降解,很难满足某些特殊情况所要求的黏弹性和稳定性。本文通过将甲基丙烯酸缩水甘油酯(GMA)接枝到天然HA上制备GMAHA衍生物,再经丫射线辐照此衍生物制备交联透明质酸以改善上述性能。主要研究内容与结果如下：1、采用红外光谱法研究HA样品接
弹性外墙乳胶涂料作为一种功能性的高档建筑装饰产品,由于能够遮盖墙体的毛细裂缝和防止混凝土炭化,越来越受到市场的青睐,但其耐沾污性差的缺点,很大程度上制约了它的推广使用。本文以涂膜表界面原理及耐沾污理论为指导,重点围绕改善弹性乳胶涂膜的耐沾污性,通过选择具有不同表面性质的弹性成膜物质体系、优化乳液配比、控制PVC含量、添加功能性助剂等方法,进行非罩面单层耐沾污弹性外墙乳胶涂料的配方设计；通过对硅溶胶
目前,青霉素发酵等间歇过程的过程监督技术主要采用如主元分析(PCA)等多元统计方法。Petri网具有的强大的图形建模和数学分析功能,尤其适用于描述间歇生产过程。本文针对青霉素发酵间歇生产过程,采用赋时Petri网和RBF神经网络相结合,提出了一种基于特征状态的过程监督方法。论文首先详细分析了青霉素发酵过程,定义了能够表征青霉素发酵各阶段特征的若干个特征状态,研究了基于RBF神经网络提取过程特征状态