120分贝白噪声对小鼠带状突触与毛细胞损伤的实验研究

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目的:观察120dB宽频带白噪声对C57BL/6J小鼠听阈阈值、耳蜗基底膜毛细胞形态与带状突触数量的影响。  方法:1.分组:20只听力正常的5-6周龄C57BL/6J小鼠随机分为四组,每组5只小鼠(5对耳蜗,n=10)。分别为3组实验组,1组对照组。实验组中分别为给予白噪声后即刻组、噪声暴露后第7天组、噪声暴露后第14天组;2.噪声暴露:实验组小鼠120dB白噪声暴露2h,即刻组立即测量小鼠听阈,第7天组和第14天组应用相同方法测量小鼠听阈值。3.取材:各组测量阈值后立即取出耳蜗用4%多聚甲醛固定,12小时后用10%EDTA脱钙4天,去除软化蜗壳表面,EP管上标记后保存在4℃冰箱中。4.免疫荧光染色:应用CtBP2、GLuR2/3和DAPI分别标记突触前递质,突触后递质和细胞核,以绿、红、蓝激发光显色,在Zeiss显微镜层扫后收集实验结果并行数据分析。5.扫描电镜:戊二醛固定的实验标本在梯度脱水和固定镀金后进行电镜扫描,之后观察耳蜗柯蒂氏器上内毛细胞和外毛细胞形态上的变化。  结果:1.噪声暴露2h后即刻组其各个频率5只小鼠阈值未引出,暴露后七天小鼠听阈部分恢复,与噪声暴露前相比仍具有明显差异性(P<0.01)。暴露后第14天,各频率的听阈值继续恢复,与暴露前的差异较第7天比有所减小,所有频率阂移与暴露前相比,仍有统计学差异(所有P<0.01)。2.内毛细胞附近的带状突触在噪声暴露后明显减少,随着时间的推移,突触的数量逐渐增多,在14天时数量较对照组具有统计学意义(P<0.01)。3.强噪声暴露后外毛细胞形态明显改变,细胞脱落丢失,静纤毛倒伏粘连,噪声暴露后各实验组形态无明显差异(P>0.05),但与对照组相比,细胞明显缺失(P<0.01)。内毛细胞噪声暴露前后扫描电镜形态上无明显改变。(P<0.01)  结论:1.120dB白噪声2小时可以导致C57 BL/6J小鼠永久性阈移。2.耳蜗内毛细胞底部带状突触具有可塑性,与听力阈值呈负相关。3.120dB强噪声2小时可以引起外毛细胞损伤,损伤不具有恢复性。
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