干扰PRDX1表达对肺癌细胞增殖、迁移、侵袭影响的初步研究

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目的研究干扰肺癌细胞内PRDX1蛋白表达对非小细胞肺癌的细胞增殖、侵袭、迁移及对顺铂敏感性的影响并揭示其相关分子机制。方法利用小干扰RNA技术降低肺癌细胞PRDX1表达并通过Q-PCR、Western blot、免疫荧光验证转染效率。进一步通过MTT法检测下调PRDX1后肺癌细胞的增殖及对顺铂敏感性的变化、划痕实验、Transwell小室实验检测细胞增殖、迁移、侵袭能力,共聚焦显微镜检测PRDX1的胞内定位及细胞微丝骨架变化。Western blot检测下调PRDX1对Akt、mTOR、ERK信号通路的影响。结果本课题研究发现:PRDX1在肺癌细胞中表达明显高于癌旁组织及肺正常支气管上皮细胞,且在不同肺癌细胞株中表达也有不同,其中A549、PC-9、H1975中表达明显高于801D、95D、HCC827细胞。以A549细胞为研究对象,我们发现PRDX1主要定位于细胞浆及细胞核中,RNA干扰下调PRDX1基因表达水平能够明显抑制A549细胞的增殖、迁移和侵袭能力,并增加A549对顺铂的敏感性,与此同时,PRDX1基因干扰导致了 A549细胞微丝骨架的重排及Akt、mTOR和ERK蛋白的磷酸化水平的降低。结论干扰PRDX1基因表达能够明显降低肺癌细胞增殖、迁移和侵袭能力并增加对顺铂的敏感性,其机制可能与PRDX1调节细胞微丝骨架及Akt、mTOR及ERK通路有关。
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