为了能对β-淀粉样蛋白(Aβ)在阿尔茨海默病(AD)发病和免疫治疗中的作用及机理的进一步研究提供必要的基础，本课题设计采用真核毕赤巴斯德(Pp)酵母以及原核大肠杆菌BL21(DE3)两个表达系统进行Aβ小分子多肽的表达，探索研究适于目的小分子多肽表达的系统，并使之高效表达和制备。由此，本实验对小分子多肽在两种体系中的表达分别进行了一系列的实验研究和探讨。课题的实施分两部分，第一部分是在真核系统中表达Aβ小分子多肽，首先分别构建表达重组质粒载体pA0815-αAβ42(单拷贝及多拷贝)和pPIC9K-aAβ42，然后将其线性化电击转染整合入Pp基因组中，鉴定阳性菌株，筛选多拷贝转化子，培养诱导表达目的蛋白，但经过SDS-PAGE、ELISA、DotBlot、WesternBlotting一系列检测未获得目的蛋白的表达。第二部分是在原核系统中表达Aβ小分子多肽，首先构建表达重组质粒载体pTWIN1/Alb-Intein-Aβ42，然后将其转化至大肠杆菌BL21(DE3)中，筛选出高效表达的菌株，融合蛋白表达量为全菌蛋白的60％，对其培养条件及融合蛋白的变性、复性、裂解条件进行优化，然后进行纯化回收，回收效率可达50％；纯化产物经分子量、等电点、免疫原性等检测证实为Aβ42，1L菌液约可获得33mg纯化的Aβ42。结论：本论文课题研究采用两种系统(真核细胞毕赤巴斯德酵母，原核细胞大肠杆菌BL21(DE3))表达具有疏水特性的Aβ小分子多肽，经过一系列实验，结果提示该多肽可能不适合在真核细胞毕赤巴斯德酵母表达系统中表达；在原核表达系统中以融合蛋白的方式获得了此小分子多肽Aβ的表达，并通过改变融合蛋白的等电点实现了目的蛋白纯化方式的简化和高效。