【摘 要】
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目的建立肾气虚哮喘大鼠模型;从分子生物学角度阐述肾气虚哮喘大鼠的可能发生机制及益肾喘宁汤的疗效机制,以期为指导临床用药提供更加有利的证据。方法采用多因素复合模拟中医病因病机建立肾气虚哮喘大鼠模型,将Wistar大鼠完全随机分为正常组、哮喘组、肾气虚哮喘组、中药组、西药组、中西结合组,每组10只,干预后第15天取肺脏组织,采用逆转录一聚合酶链反应（RT-PCR）测定法检测肺组织中 T-bet、GAT
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目的建立肾气虚哮喘大鼠模型;从分子生物学角度阐述肾气虚哮喘大鼠的可能发生机制及益肾喘宁汤的疗效机制,以期为指导临床用药提供更加有利的证据。方法采用多因素复合模拟中医病因病机建立肾气虚哮喘大鼠模型,将Wistar大鼠完全随机分为正常组、哮喘组、肾气虚哮喘组、中药组、西药组、中西结合组,每组10只,干预后第15天取肺脏组织,采用逆转录一聚合酶链反应（RT-PCR）测定法检测肺组织中 T-bet、GATA-3、RORγt、Foxp3、IL-6、TGF-β等因子 mRNA 的表达水平,分析其溶解曲线,采用SYBR Green Ⅱ法进行相对定量分析;根据益肾喘宁汤对肾气虚哮喘大鼠肺组织上述因子基因表达水平的影响,探讨其治疗肾气虚哮喘的可能疗效机制。结果成功复制肾气虚哮喘大鼠模型;模型组与正常组比较结果:Foxp3、T-bet基因低表达,RORyt、GATA-3、IL-6基因高表达;TGF-β基因表达无显著意义;经益肾喘宁汤治疗后,GATA-3、IL-6基因表达降低,T-bet基因表达升高,。与西药联合后,Foxp3基因表达升高,RORγt基因表达降低。结论采用多因素复合模拟中医病因建立肾气虚哮喘模型稳定可靠。采用逆转录一聚合酶链反应（RT-PCR）测定法检测肺组织中T-bet、GATA-3、RORγt、Foxp3、IL-6、TGF-β等因子mRNA的表达水平,揭示了肾气虚哮喘大鼠模型肺组织中Th 1亚群转录因子基因低表达,Th2亚群转录因子基因高表达,表明哮喘发病机制与Th17/Treg细胞失衡相关。运用基于逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）的生物学技术,发现益肾喘宁汤治疗肾气虚哮喘模型组转录因子及细胞因子T-bet、GATA-3、RORyt、Foxp3、IL-6、TGF-β的表达水平呈现不同程度的回调,表明益肾喘宁汤可通过调整Th17/Treg细胞失衡,减轻气道炎症有效治疗哮喘。运用生物学技术,从整体上阐释了肾气虚哮喘发生过程转录因子及细胞因子T-bet、GATA-3、RORγt、Foxp3、IL-6、TGF-β表达特征及其机制;从整体和系统的层面揭示了益肾喘宁汤对肾气虚哮喘调节作用的疗效机制,显示了益肾喘宁汤多通路、多靶点的综合治疗特色。与中医的整体观相符,在中医药领域具广泛应用前景。
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