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ATP是生物体内重要的供能物质,是生命活动所需能量的直接来源。ATP作为一种生化药物,在临床上广泛用于对癌症、进行性肌肉萎缩、中风后遗症、心肌炎、冠状动脉硬化及肝炎等的治疗。本论文内容包括实验所用的毛霉菌ZGB1的鉴定;糖化液菌体培养基的制备及响应面法优化;雅致放射毛霉遗传转化系统的构建;apt1基因在雅致放射毛霉中的克隆表达通过形态观察、生理生化特性分析、18S及ITSrDNA序列比对,对该菌进行鉴定。鉴定该菌为雅致放射毛霉的突变株,命名为Actinomucor elegans ZGB1。该菌在分类学上的地位真菌界(KingdomFungi)、接合菌门(Phylum Zygomycota)、接合菌纲(Zygomycetes)、毛霉目(Mucorales)、毛霉科(Mucoraceae)、放射毛霉属(Actinomucor)、雅致放射毛霉(Actinomucor elegans)。通过单因素试验筛选出(NH4)2SO4为最适无机氮源,MgSO4·7H2O为最适无机盐,以玉米粉糖化液替代葡萄糖,同时添加玉米浆,组成糖化液发酵培养基,并采用响应面法进行优化。得到最适配方:还原糖42.13g/L,(NH4)2SO45.60g/L,玉米浆14.23g/L,MgSO4·7H2O0.92g/L。优化后的糖化液发酵培养基菌体产量比原培养基提高19.45%,ATP产量提高10.83%。以菌龄为4h的雅致放射毛霉孢子为材料,通过2.0%的纤维素酶和0.5%的蜗牛酶混合液,于30℃酶解3h,获得具有较高再生活力的原生质体。在PEG-CaCl2介导下,质粒pCB1004-hph转化雅致放射毛霉原生质体,构建雅致放射毛霉转化系统。利用PCR技术扩增酿酒酵母ATP合成关键酶基因apt1,并将其克隆至质粒pCB1004-Pgpd的相应位点,得到有强启动子Pgpd驱动的apt1基因表达载体pCB1004-Pgpd-apt1。在PEG-CaCl2介导下,表达载体转化雅致放射毛霉原生质体,获得ATP高产工程菌。其ATP产量及摩尔转化率比出发菌株提高44.04%。