生姜萃取粉中黄酮类化合物的提取分离和鉴定

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生姜既是常用的香料和功能性食品,也是一种治疗多种疾病的传统中草药。生姜含有很多种生物活性物质,例如生姜精油,多糖类,烯烃类,黄酮类,甾醇类,姜油树脂,姜黄素,姜辣素等。经超临界CO2萃取生姜精油后剩余的姜粉中主要含有黄酮类物质,它具有多种生理功能,如抗氧化、抗癌、抗肿瘤、抗微生物和抗血小板聚集等。为了避免原料的浪费,充分利用其药物价值,本文采用真空减压提取法,大孔吸附树脂法和高速逆流色谱法从生姜萃取粉中提取黄酮类物质。然后采用液相-质谱连用技术对分离出的化合物进行鉴定。主要研究结果如下:(1)采用减压加热法提取生姜萃取粉中的黄酮类物质,在真空度为-0.1 MPa条件下,分别考察了不同乙醇体积分数、提取时间、料液比和提取温度对黄酮提取得率的影响。得出减压加热法提取生姜萃取粉黄酮的最佳工艺条件是:乙醇体积分数为80%,提取时间为14 min,料液比为1:40(g/mL),提取温度为35℃,最佳提取次数为2次,黄酮得率为2.025%。(2)采用X-5大孔吸附树脂来纯化生姜萃取粉中的粗黄酮提取物,分别考察了上样流速、上样浓度和上样量对大孔吸附树脂吸附效果的影响;解析液的乙醇体积分数和洗脱流速对大孔吸附树脂解析效果的影响。得出X-5大孔吸附树脂的最佳纯化工艺为:上样浓度为1.5 mg/mL,上样流速为1.0mL/min,最大上样量为35mL,解析液乙醇体积分数为70%,洗脱流速为1.0 mL/min。经大孔吸附树脂纯化后,测的黄酮含量从7.32%提高到24.51%,精制倍数达到3.3倍。(3)采用高速逆流色谱法分离和纯化生姜萃取粉的黄酮类物质。通过测定生姜萃取粉中黄酮提取物在所选溶剂系统的分配系数,选取正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水(4:5:4:5)的溶剂体系来分离化合物5;选取正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水(1:5:1:5)的溶剂系统来分离化合物1-4。(4)采用液相-质谱联用技术对HSCCC分离出的5种黄酮化合物进行结构鉴定,得出的结果如下:化合物1为芦丁,化合物2为桔皮素,化合物3为牡荆素,化合物4为杨梅素-3-O-葡萄糖苷,化合物5为槲皮素-3-O-葡萄糖苷。
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