论文部分内容阅读
过敏反应又称变态反应,是指机体受抗原或半抗原物质的刺激,从而产生的一种超常的病理性免疫反应。过敏反应会引起呼吸系统及心血管功能的紊乱,严重的甚至会引起人体的休克。近年来,过敏反应的发病率呈现出逐年上升的趋势,已经成为了影响人们生活质量和威胁人类健康的重要因素。目前,过敏反应还缺乏一个全面的,系统的预防、诊断及治疗体系,临床诊断一般都是依据病人的过敏史来进行的,极易造成假阳性。目前也还没有任何一种方法能够完全治愈过敏性疾病,即使采用毒副作用较大的药物控制也不能确保不复发。因此,研究一种全新的、准确的过敏诊断方法,寻找天然安全的过敏治疗药物对过敏的预防、诊断及治疗都具有极为重大的意义。代谢组学是近年来发展起来的一门新兴学科,其主要以机体内小分子的代谢产物为研究对象,利用现代高精密度的分析方法来研究机体在受到环境、化学等刺激后,机体所做出的反应和变化。生物机体的代谢处于一个动态的平衡之中,任何疾病的发生和发展都会打破机体的代谢平衡,从而导致机体的代谢物质发生明显变化。因此,通过代谢组学的方法,能够找出与疾病相关的代谢产物,继而帮助人们对疾病进行诊断、预防、治疗及预后判断。本研究利用卵蛋白构建了SD大鼠过敏模型,研究了灵芝多糖p-葡聚糖、酵母p-葡聚糖、白藜芦醇的抗过敏效果,并利用代谢组学的方法对大鼠血液进行研究,找出了过敏反应的代谢标志物,且对其抗过敏机制进行了探讨。实验结果如下:1.过敏模型的建立本实验根据大鼠的过敏症状和IgE水平两项指标,对比不同卵蛋白浓度构建过敏模型的效果,确定过敏模型的卵蛋白浓度为20mg/mL。2.Q-Tof检测方法优化样品前处理的方法时,通过对不同有机溶剂(甲醇、乙腈以及甲醇和乙腈的混合物)除蛋白效果和稀释倍数对样品检测结果的优化,选用乙腈为除蛋白试剂,稀释倍数为4倍。对缓冲液的选择,本实验通过对比了三种不同的缓冲溶液,结果发现甲酸铵的效果最差,可能与其离子化抑制作用有关。相对甲酸,乙酸效果更好。通过对比三个不同浓度梯度,最终确定0.2%的乙酸作为本实验流动相的水相。经比较分析,最终确定流速为0.35mL/min,分析时间为35min。3.抗过敏的代谢组学研究本实验通过对三种天然产物的抗过敏效果,发现白藜芦醇的抗过敏效果较好,其次是酵母p-葡聚糖和灵芝β-葡聚糖。其作用途径主要通过调节免疫细胞和清除自由基从而达到抗过敏效果。