【摘 要】
:
目的:运用网络药理学方法,以黄芪复方中药靶点与冠心病靶点所构成的交集靶点为纽带,探讨黄芪复方中药治疗冠心病的预测靶点与作用机制。通过细胞培养技术,研究对象选择大鼠心肌微血管内皮细胞(RCMECs),观察黄芪复方中药含药血清对同型半胱氨酸诱导RCMECs损伤的干预作用及炎症反应的机制研究,进一步探讨黄芪复方中药治疗冠脉微循环障碍的作用机制,拓展冠脉微循环障碍治疗途径,也为黄芪复方中药在中医临床运用中
论文部分内容阅读
目的:运用网络药理学方法,以黄芪复方中药靶点与冠心病靶点所构成的交集靶点为纽带,探讨黄芪复方中药治疗冠心病的预测靶点与作用机制。通过细胞培养技术,研究对象选择大鼠心肌微血管内皮细胞(RCMECs),观察黄芪复方中药含药血清对同型半胱氨酸诱导RCMECs损伤的干预作用及炎症反应的机制研究,进一步探讨黄芪复方中药治疗冠脉微循环障碍的作用机制,拓展冠脉微循环障碍治疗途径,也为黄芪复方中药在中医临床运用中提供理论实验依据。材料与方法:(1)基于网络药理学,通过数据库检索黄芪复方中药成分靶点与冠心病靶点,取两者交集靶点,运用PPI网络和DAVID 6.8数据库分析交集靶点体现出关键靶点以及交集靶点所参与的生物学过程等,探讨黄芪复方中药治疗冠心病可能的作用机制;运用Cytoscape 3.6.0软件对“黄芪复方-中药-成分-交集靶点网络”进行网络拓扑分析,明确黄芪复方中药的关键成分。(2)根据实验需要将50只雄性SPF级SD大鼠按照10只为一组的标准,随机分为五组,分别命名为空白组、模型组、黄芪复方中药低剂量组、黄芪复方中药中剂量组、黄芪复方中药高剂量组,空白组和模型组:给予相同体积蒸馏水灌胃处理,黄芪复方中药低剂量组按照1.8 g/kg标准灌胃、黄芪复方中药中剂量组按照3.6 g/kg标准灌胃、黄芪复方中药高剂量组按照7.2 g/kg标准灌胃。五个组别大鼠每日灌胃2次,连续7日。在第7日,灌胃处理1小时后的五组大鼠,先将其麻醉,然后通过腹主动脉方式进行取血,将采集到的血清静置、高速离心、过滤血清杂质和灭活,最终将处理完毕含药血清放于-80℃冰箱中保存。(3)将购买所得的大鼠心肌微血管内皮细胞进行传代培养、冷冻及复苏,倒置显微镜观察形态,CD31免疫荧光法鉴定细胞阳性率大于95%,以备用。将细胞分为空白组、模型组、黄芪复方中药低、中、高剂量组,除空白组外其他各组都给予同型半胱氨酸诱导细胞损伤,黄芪复方中药低、中、高剂量组分别给予对应的低、中、高剂量含药血清与细胞共同培养24小时,收集各组细胞上清液,MTT法检测细胞活性,ELISA法检测TNF-α和IL-6含量。结果:1.本次研究经过前期对数据的检索、筛选、整理、归纳,得出黄芪复方四味中药黄芪、当归、全蝎、蜈蚣共包含39个中药有效成分,其对应326个靶点,冠心病包含1024个靶点。利用网络药理学研究黄芪复方中药与冠心病关系,可知黄芪复方中药30个有效成分对应94个交集靶点。经过对交集靶点PPI网络拓扑分析和富集分析,黄芪复方中药以IL-6、TNF等关键靶点和多条通路为基础起到治疗冠心病的作用。2.通过ELISA法分析检测五组RCMECs上清液中IL-6、TNF-α含量并进行比较:与空白对照组比较,模型组细胞上清液中IL-6、TNF-α含量显著升高(P<0.01);与模型组比较黄芪复方中药高剂量组、黄芪复方中药中剂量组以及黄芪复方中药低剂量组RCMECs上清液中IL-6、TNF-α含量均显著降低(P<0.01)。结论:1.通过网络药理学分析,黄芪复方中药以IL-6、TNF等关键靶点为基础起到治疗冠心病的作用。2.黄芪复方中药含药血清能够明显降低实验组细胞中IL-6、TNF-α含量,抑制炎症反应,减轻Hcy对大鼠心肌微血管内皮细胞损伤,可能是其治疗冠脉微循环障碍的机制之一,而且黄芪复方中药组之间存在量效关系。
其他文献
目的:观察以“肾络病”为组方原理芪蓟肾康汤对转基因IgAN小鼠TGF-β1/Smads信号通路(体内)及对AngⅡ诱导人肾小球系膜细胞FN及TGF-β1表达情况(体外),探求芪蓟肾康汤(低、中、高剂量)在不同时间点对IgAN疗效的差异性及其中药药效机制,验证科学假说“补、清、消”肾络理论正确性,挖掘IgAN病理机制。材料与方法:1.构建并评价转基因IgAN小鼠、分组情况及检测方法:体内实验中:构建
目的:本研究中,把舌象与健康状况调查问卷辨识中医体质的结果作对比,探究中医体质与舌象二者之间的关系,来证明舌象辨识中医体质的可行性,并找到影响舌象辨识中医体质的相关因素。此研究可以为今后通过舌象来辨识中医体质打下坚实的理论基础,也为中医体质辨识这一研究领域开辟了新的思路与方法。方法:所有样本来自于2019年10月——2020年11月在事先知情同意的基础上自愿参与本调查的辽宁中医药大学大一及大二本科
目的:本研究立足于课题组前期研究成果及AD现代医学病理机制研究现状的基础之上,塑造脾阳虚证认知障碍大鼠模型,探讨脾虚状态下炎症及过氧化损伤与AD的关系,并以温脾升阳法调控脾阳虚证认知障碍大鼠的炎症及氧化应激指标,从行为学、病理学、蛋白质组学等角度评价温脾升阳法防治AD的疗效机制,为中医学防治AD提供一定的理论基础及实验依据。材料与方法:本次实验采用3月龄的SPF级SD健康大鼠,雌、雄各30只。用分
目的:活血祛湿颗粒剂是卢秉久教授临床治疗非酒精性脂肪性肝炎(Nonalcoholic steatohepatiti,NASH)的常用经验方。本研究以NASH小鼠模型为实验对象,以活血祛湿颗粒剂为干预手段,旨在探讨活血祛湿颗粒剂对NASH小鼠模型的治疗效果和作用机制。材料与方法:采用高脂饮食诱导方法以建立NASH小鼠模型,通过小鼠肝组织的病理状态作为评价标准来验证模型。中药组中,分别给予各组小鼠低、
目的:运用网络药理学方法,筛选甘露消毒丹治疗流感的有效成分、关键靶点和主要通路,并探究其作用机制。通过建立雾霾环境下IV感染BALB/c小鼠模型,从组织学、分子生物学等水平研究甘露消毒丹精简方对雾霾条件下IV感染小鼠的NLRP3炎性小体及相关炎症因子、上游调节因子、病毒载量的影响,探讨甘露消毒丹精简方对雾霾环境下IV病毒感染的作用机制,为临床中医药治疗雾霾环境下IV病毒感染提供实验依据;通过清热解
目的:本实验采用大鼠冠状动脉前降支结扎术配合力竭式游泳及节食建立心梗后心衰大鼠模型。观察大鼠一般情况、行超声心动图检测并计算心功能确定心衰模型成立后,分组给予补肾活血复方、阳性对照药物卡托普利及安慰剂进行干预。观察心肌组织中CaMKⅡ、HDAC4表达情况,探究补肾活血复方能否下调心肌组织中的Ca MKⅡ、HDAC4含量的表达,改善心肌肥厚,为中医药治疗慢性心衰提供新靶点。材料与方法:1.慢性心衰大
目的:基于PI3K/AKT信号通路,从多水平、多层次、多靶点角度出发观察中药复方参龙煎剂对IPF大鼠血管新生的影响,探讨参龙煎剂干预IPF血管新生机制研究,进一步挖掘中药复方干预IPF的作用靶点。材料与方法:1.将120只雄性大鼠随机分为4组,即空白对照组、模型对照组、吡非尼酮组、参龙煎剂组,每组30只;2.通过气管内注射博来霉素的方法构建IPF动物模型,于造模次日分别给予相应药物进行干预。根据I
目的:以中医古代文献为基础,收集治疗冠心病的方剂,将组方和用药进行分类、归纳,总结方药使用情况及组方规律,提炼出临床实践中有效的药物和处方,为现代的临床用药提供参考。材料与方法:以“胸痹”、“心痛”、“胸痹心痛”为检索词,通过检索中医典海以及中医智库数据库,收集中医古代文献中用于治疗冠心病的方剂,并将组方和用药进行分类、归纳。通过分析方剂所用药物的频次、频率,以及药物性味归经、功效的频次、频率,将
目的:探讨参仙升脉口服液能否通过抑制钙超载来减轻病态窦房结综合征小鼠窦房结纤维化,进而改善窦房结功能,并探究其机制是否与Ca2+/Ca M-Ca MKII通路相关。材料与方法:通过随机数字表方法将SPF级别C57BL/6小鼠随机分为3组:假手术组(SHAM)、病态窦房结综合征模型组(SSS)、参仙升脉口服液处理组(SXSM),每组10只;于各组小鼠皮下置入微量渗透泵,其中SSS组和SXSM组持续泵
目的:通过观察“丹蒌片加栀子、连翘”对ApoE-/-小鼠的血脂水平、形态学变化以及巨噬细胞极化相关指标的影响,探讨“清热解毒法”调控巨噬细胞极化对抗动脉粥样硬化的作用及机制,为临床应用提供科学的实验依据。材料与方法:40只SPF级健康AopE-/-小鼠,自由摄食饮水,适宜性喂养1周,随机分成5组,对照组、模型组、丹蒌片组、丹蒌片加栀子、连翘组和辛伐他汀组,每组8只。对照组小鼠每日普通饲料喂养,模型