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前言：研究发现，早期肺癌、乳腺癌及肾癌患者经常出现（3p21.3）染色体异常。这个区域共有19个基因，都在不同程度上表现出了相应的肿瘤抑制作用（包括细胞分化、增殖、信号转导及凋亡）。RBM5（也被称为g15、RBM5及H37）位于这19个基因的末端，研究证明：在肺癌及乳腺癌患者中这个染色体异常区域只包括17个基因，而RBM5不在其中，这个现象说明了RBM5在肺癌及乳腺癌发病中的特殊地位及重要作用。为了研究RBM5在肺腺癌及乳腺癌发病机制中作用，我们搜集了30例原发肺腺癌患者的肺癌组织及癌旁正常肺组织标本（取自同一患者），检测RBM5及相关基因在蛋白水平的表达；然后，将pcDNA3.1-RBM5过表达质粒转染人肺腺癌细胞A549及人乳腺癌细胞MCF7进行体外实验研究；并用A549、MCF7细胞在BALA/c裸鼠建立肺腺癌移植瘤模型及乳腺癌移植瘤模型，通过给予pcDNA3.1-RBM5干预肿瘤生长来进行体内实验研究。方法：Western blot/免疫组化法检测人肺腺癌组织及癌旁正常组织中RBM5及Bcl-2在蛋白水平的表达；脂质体法瞬时转染pcDNA3.1-RBM5于A549及MCF7细胞，获得高表达RBM5的体外细胞模型；Annexin V/PI双染法检测过表达RBM5的细胞凋亡情况；流式细胞术检测过表达RBM5的细胞周期情况；PCR Array筛查细胞过表达RBM5后相关凋亡基因在mRNA水平的变化；将A549，MCF7细胞接种于BALB/c裸鼠获得移植瘤模型，再以减毒沙门氏菌为载体携带pcDNA3.1-RBM5经尾静脉注射入裸鼠体内，研究RBM5在体内对移植瘤生长的影响及机制；TUNEL法检测肿瘤组织凋亡情况；RT-PCR/realtime-PCR法检测细胞或肿瘤组织中RBM5，TNF-α等在mRNA水平的表达；ELISA/Western blot/免疫组化法检测细胞或肿瘤组织中RBM5，P-ERK，PCNA，TNF-α，cleaved-caspase-3、8、9，及cleaved-PARP在蛋白水平的表达。结果：与癌旁正常肺组织对比，肺腺癌组织RBM5的蛋白水平表达显著降低的有23例（76.7%），表达量未见显著差异或不同程度升高的有7例（23.3%）（χ2=2.963， P<0.05）；与癌旁正常肺组织对比，肺腺癌组织Bcl-2蛋白水平表达量升高的有21例（70%），表达量降低的有9例（30%）（χ2=2.179， P<0.05）；转染pcDNA3.1-RBM5后，获得RBM5的mRNA及蛋白均高表达的A549细胞及MCF7细胞（p<0.01）；MTT结果显示，转染pcDNA3.1-RBM5后, A549及MCF7生存率显著下降（p<0.05）；流式细胞术结果显示，转染pcDNA3.1-RBM5后, A549及MCF7出现明显的早期凋亡（p<0.01），A549还出现细胞周期阻滞（G1期）（p<0.05）；转染pcDNA3.1-RBM5后，A549细胞的RBM5，TNF-α，Bax，cleaved-caspase3、8、9，及cleaved-PARP蛋白表达显著升高（p<0.05），而Bcl-2，p-ERK，PCNA蛋白表达显著下降（p<0.05）；转染pcDNA3.1-RBM5后，MCF7细胞的RBM5，TNF-α，cleaved-caspase-3、8，及cleaved-PARP蛋白表达显著升高（p<0.05）；成功建立了肺腺癌及乳腺癌裸鼠移植瘤模型，尾静脉注射携带pcDNA3.1-RBM5质粒的减毒沙门氏菌后肿瘤生长均受到明显抑制（p<0.01）；琼脂平板菌落计数实验显示，尾静脉注射后72h时，减毒沙门氏菌在各脏器组织均有不同程度定植，其中尤以肿瘤组织为甚，差异具有统计学意义（p<0.05），尾静脉注射后7d时，减毒沙门氏菌在各脏器组织中的定植数量显著减少，有的脏器组织甚至接近于零，但在肿瘤组织中仍有大量定植，差异具有统计学意义（p<0.05）；Western blot/免疫组化法测得RBM5蛋白在肺腺癌移植瘤及乳腺癌移植瘤组织中均高表达（p<0.05）；经pcDNA3.1-RBM5质粒治疗后，肺腺癌及乳腺癌肿瘤组织均出现显著凋亡（p<0.01）；给予pcDNA3.1-RBM5后，肺腺癌组织中RBM5，Bax，TNF-α，cleaved-caspase-3、8、9，及cleaved-PARP蛋白表达显著升高（p<0.05），而Bcl-2，p-ERK，PCNA显著下降（p<0.05）；给予pcDNA3.1-RBM5后，乳腺癌组织中RBM5，TNF-α，cleaved-caspase-3、8，及cleaved-PARP蛋白表达显著升高（p<0.05）。结论：1.证实肿瘤抑制基因RBM5在人原发性肺腺癌组织中蛋白水平的表达低于癌旁正常肺组织，而Bcl-2在人原发性肺腺癌组织中蛋白水平的表达高于癌旁正常肺组织，该结果提示RBM5的缺失及凋亡受抑制与肺腺癌的发生发展密切相关。2.通过基因瞬时转染，获得高表达RBM5的A549及MCF7细胞模型。证明RBM5可以在体外诱导A549发生细胞凋亡、细胞周期阻滞及增殖抑制。同时，RBM5在体外可诱导MCF7细胞凋亡的发生。3.通过建立裸鼠肺腺癌移植瘤模型及乳腺癌移植瘤模型，证实RBM5可抑制肺腺癌及乳腺癌移植瘤的生长；同时，证实RBM5在体内诱导肺腺癌发生细胞凋亡及增殖抑制，并在体内诱导乳腺癌发生细胞凋亡。4.通过对肺腺癌的体内、外实验研究证实，RBM5可通过诱导细胞凋亡及抑制细胞增殖的共同作用来抑制肺腺癌生长。其诱导凋亡机制为，一方面RBM5可能通过促进TNF-α的表达从而活化caspase-8诱导细胞凋亡；另一方面RBM5可下调Bcl-2蛋白，上调Bax蛋白，导致Bax/Bcl-2比值升高，从而活化caspase9诱导细胞凋亡。此外，RBM5抑制肺腺癌细胞增殖的机制可能与抑制Ras/Raf/MEK/Erk信号传导通路有关。5.通过对乳腺癌的体内、外实验研究证实，RBM5可通过诱导细胞凋亡抑制乳腺癌生长，其机制可能为RBM5通过促进TNF-α的表达从而活化caspase-8诱导细胞凋亡，该结果与肺腺癌研究结果一致，提示，RBM5对于TNF-α的作用可能是其发挥抑癌作用的重要机制之一。6.本研究通过对肺腺癌及乳腺癌的体内、外实验研究，确定了RBM5对肺腺癌及乳腺癌的抑癌作用，为深入研究RBM5对于肺腺癌及乳腺癌的作用及机制提供理论依据，同时对于临床上以RBM5为靶点诊治肺腺癌及乳腺癌的研究具有一定的指导意义。