盐碱地的形成主要来自人为经济活动与自然环境的变化。目前全球的盐碱地面积早已达到10亿公顷,令世界上的可耕地面积大大缩减。在高度盐渍化的地区,许多农作物都无法正常生长甚至会死亡,最终导致作物产量、生产效益和产品品质都将受到严重的影响,阻碍着农业的可持续发展。中国耐盐植物品种繁多,通过生物工程技术将盐生植物的耐盐基因导入至其他甜土作物中,能够有效地提高作物的耐盐性。一种野生的耐盐芦苇（Phragmites Australis trin）,主要分布于我国西北地区,具有极强的耐盐性,属于禾本科植物,是提供耐盐相关功能基因的优质供体。耐盐芦苇提供的与耐盐相关的外源功能基因,为改善水稻等禾本科作物的耐盐性,起到了极其重要的作用。目前已被广泛应用于植物遗传转化的双元细菌人工染色体（binary bacterial artificial chromosome,BIBAC）载体和普通双元载体有所不同,普通双元载体能载入的外源DNA片段不会超过20 Kb,所能携带的功能基因也只有几个。而双元细菌人工染色体（BIBAC）载体能在大肠杆菌和农杆菌中穿梭,它不仅能通过农杆菌介导将多基因大片段DNA直接转入植物,还能构建大片段DNA文库。本研究通过构建芦苇基因组大片段DNA-BIBAC载体并转化水稻,以获得创新耐盐水稻种质、建立大片段转化技术体系、并为芦苇的耐盐基因克隆奠定基础,研究结果如下:1.通过制备Mb级耐盐芦苇基因组DNA,酶切后利用脉冲电泳分离技术将芦苇大片段DNA分离为50-100 Kb,100-150 Kb,100-350 Kb三个不同区段,并与酶切回收的BIBAC-S进行连接,成功构建了耐盐芦苇不同大小的大片段DNA-BIBAC载体,然后将其导入至大肠杆菌感受态细胞中,通过蓝白斑筛选出阳性重组子,利用脉冲场电泳检测阳性重组子内大片段的稳定遗传,最后进行克隆保存,完成了大片段BIBAC载体的构建。2.将插入耐盐芦苇不同大小的大片段DNA-BIBAC载体转化根癌农杆菌EHA105,以粳稻中花11成熟胚愈伤组织为受体,通过根癌农杆菌介导转化法,进行水稻的遗传转化。农杆菌EHA105介导侵染后的愈伤组织,经过潮霉素的筛选、分化、生根、获得了拟转基因水稻植株。对拟转基因水稻植株的基因组DNA进行PCR检测分析,最终获得23株转基因阳性植株。实验结果表明,农杆菌介导的携带不同大片段的BIBAC载体已经成转入中花11水稻中,为后续耐盐突变体的筛选、创造耐盐水稻新品种以及提高水稻耐盐性奠定了技术基础。