【摘 要】
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HSP70s在植物的热胁迫中发挥着重要的作用。HSP70有许多辅助分子伴侣,其中BAG6和Fes1A作为HSP70的结合蛋白,即辅助分子伴侣,对拟南芥耐热性有着至关重要的作用。目前,对植物辅助分子伴侣之间如何相互作用知之甚少。本研究中,我们首先确定BAG6的亚细胞定位。根据BAG6-GFP亚细胞荧光信号,以及纯化的细胞核和液泡组分western-blot分析,揭示BAG6蛋白在细胞核定位表达,而并
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HSP70s在植物的热胁迫中发挥着重要的作用。HSP70有许多辅助分子伴侣,其中BAG6和Fes1A作为HSP70的结合蛋白,即辅助分子伴侣,对拟南芥耐热性有着至关重要的作用。目前,对植物辅助分子伴侣之间如何相互作用知之甚少。本研究中,我们首先确定BAG6的亚细胞定位。根据BAG6-GFP亚细胞荧光信号,以及纯化的细胞核和液泡组分western-blot分析,揭示BAG6蛋白在细胞核定位表达,而并非文献报道的液泡定位蛋白。通过对fes1a bag6双突变体的耐热性变化分析,我们发现,与fes1a相比,fes1a bag6双突变体的耐热性明显增加,但钙调蛋白抑制剂降低了fes1a bag6双突变体耐热性。实验还发现,BAG6中IQ motif对于BAG6的功能至关重要。由于BAG6位于细胞核中,提示信号转导可能涉及核钙信号。此外,实验还发现BAG6对fes1a的调控与TBP对fes1a的调控归属不同的信号通路。Hop为HSP70的另一辅助分子伴侣。本实验室前期研究发现hop单突变体对盐不敏感,但hop1 hop2双突变体呈现盐敏感表型;对HSP70的另一辅助分子伴侣Fes1A而言,仅在萌发期且超过125 m M Na Cl胁迫下,fes1a呈现盐敏感表型。在本实验中发现,与hop1 hop2双突变体或fes1a相比,fes1a hop1 hop2三突变体对盐更敏感,在75 m M Na Cl胁迫时即出现明显的盐敏感表型。然而,fes1a hop1 hop2三突变体,hop1 hop2双突变体和fes1a在MS培养基上均正常生长,长势与WT野生型一致。这些结果提示HSP70的辅助分子伴侣Fes1A和Hop可能协同调控拟南芥的耐盐性。本课题主要创新点:1、IQ motif对于BAG6功能的有效性至关重要;2、钙调蛋白参与信号转导;3、BAG6定位于细胞核中;4、BAG6与TBP对fes1a的调控归属不同的信号通路;5、Fes1A和Hop协同调控拟南芥的耐盐性。
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