目的通过实验验证在胃癌细胞增殖、侵袭迁移中,蛋白激酶家族CAMK中钙离子/钙调蛋白依赖性蛋白激酶1G（CAMK1G）是否对其产生影响,并对其中发生的机制进行推论。方法1、细胞株的筛选与培养:选取两种胃癌细胞株BGC-823、SGC-7901进行培养,根据本实验室前期研究发现,和健康胃黏膜上皮细胞GES-1相比,CAMK1G蛋白在SGC-7901、BGC-823细胞中均上调,因此选择以上两种细胞株进行平行实验。2、质粒和si RNA转染实验:采用转染试剂Lipo2000,将实验室前期合成质粒（pc DNA3.1-myc-CAMK1G重组质粒）和CAMK1G si RNA分别转入上述两种细胞株中。过表达转染分为3组:空白组、空载体组和pc DNA3.1-myc-CAMK1G转染组;si RNA转染则分为:空白组、转染对照组和CAMK1G si RNA转染组。3、上调和下调CAMK1G后通过MTT验证胃癌细胞增殖情况。4、转染CAMK1G质粒和si RNA后进行克隆形成实验观察胃癌细胞生长增殖情况。5、在两株胃癌细胞中分别转入CAMK1G质粒和si RNA后利用划痕实验观察细胞迁移能力。6、利用Transwell实验,观察在两株胃癌细胞中分别上调和下调CAMK1G后两者侵袭迁移能力情况。7、Western blotting法在两株胃癌细胞中分别转入CAMK1G质粒和si RNA后,观察本实验选取的EMT相关标志物（Snail、N-cadherin、E-cadherin）和细胞周期相关标志物（WEE1、CDK1-T14、CDK1-Y15、Cyclin B1）表达的情况。结果1、上调组CAMK1G蛋白表达与空白组和空载体组相比,显著增加（P<0.01）,而si RNA处理组CAMK1G蛋白表达则显著降低（P<0.01）。2、MTT实验结果,显示CAMK1G的过表达对细胞SGC-7901、BGC-823的增殖起到显著的促进作用（P<0.01）;而下调CAMK1G后结果相反（P<0.01）。3、在克隆形成实验结果中,过表达CAMK1G后,SGC-7901、BGC-823细胞克隆数目显著增多（P<0.01）;而下调CAMK1G后,SGC-7901、BGC-823细胞克隆数目则明显减少（P<0.01）。4、划痕实验结果表明,过表达CAMK1G,SGC-7901、BGC-823细胞划痕相对距离减小,细胞迁移率升高（P<0.01）;而下调CAMK1G,SGC-7901、BGC-823细胞划痕相对距离增大,细胞迁移率降低（P<0.01）。5、通过Transwell实验结果发现过表达CAMK1G后,胃癌细胞的侵袭、迁移数目显著增多（P<0.01）;而下调CAMK1G,胃癌细胞的侵袭、迁移数目显著减少（P<0.01）。6、通过western blotting结果显示,与对照组相比上调CAMK1G后,N-cadherin、Snail蛋白以及MPF信号通路相关蛋白WEE1、Cyclin B1表达增加,而E-cadherin蛋白表达减少,CDK1-T14、CDK1-Y15磷酸化水平升高（P<0.01）;转入CAMK1G si RNA后与对照组相比,si RNA处理组显示,N-cadherin、Snail以及细胞周期蛋白WEE1、Cyclin B1表达量减少,E-cadherin蛋白表达量增加,CDK1-T14、CDK1-Y15磷酸化水平降低（P<0.01）。结论在实验中结果显示过表达蛋白激酶CAMK1G可以促进胃癌细胞的增殖、侵袭和迁移;而下调CAMK1G抑制胃癌细胞的增殖、侵袭和迁移。推测可能与蛋白激酶CAMK1G通过调控WEE1影响胃癌细胞上皮间质转化有关。