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【研究背景】早发型子痫前期（Early Onset Preeclampsia,EO-PE）是一种严重威胁母儿健康的妊娠期并发症,滋养细胞侵袭不足导致的胎盘重塑不良是其发病的核心环节。有研究报道,微小RNA（micro RNA,miRNA）介导的转录后调控网络广泛参与子痫前期发病的多个环节,其中,miRNA-145-3p/5p可能通过调控滋养细胞功能和上皮间质转化通路（Epithelial Mesenchymal Transition,EMT）参与EO-PE发病,但证据十分有限。【研究目的】鉴定与EO-PE相关的miRNA调控网络;筛选可能在EO-PE发病中发挥调控作用的关键miRNA（miRNA-145-3p/5p）并初步确定其机制,为揭示EO-PE的发病机制提供新的视角。【研究方法】1.加权基因共表达网络分析结合差异分析鉴定EO-PE胎盘中差异表达的核心基因及miRNA分子,通过Target Scan、miRDB和miRTar Base数据库构建EO-PE胎盘中的miRNA调控网络并鉴定潜在的核心miRNA（miRNA-145-3p/5p）供后续研究。2.通过茎环法实时荧光定量PCR验证miRNA-145-3p在EO-PE胎盘中的表达。转染miRNA-145-3p的模拟物和抑制剂,体外构建过表达和沉默滋养细胞模型;利用CCK-8实验、平板克隆形成实验、划痕愈合实验和Transwell实验检测滋养细胞增殖、迁移和侵袭能力的变化,评估miRNA-145-3p对滋养细胞生物学特性的影响;蛋白免疫印迹实验检测EMT通路关键分子蛋白表达水平变化,评估miRNA-145-3p对EMT通路的影响。3.通过茎环法实时荧光定量PCR验证miRNA-145-5p在EO-PE胎盘中的表达。转染miRNA-145-5p的模拟物和抑制剂,体外构建过表达和沉默滋养细胞模型;利用CCK-8实验、平板克隆形成实验、划痕愈合实验和Transwell实验检测滋养细胞增殖、迁移和侵袭能力的变化,评估miRNA-145-5p对滋养细胞生物学特性的影响;蛋白免疫印迹实验检测EMT通路关键分子蛋白表达水平变化,评估miRNA-145-5p对EMT通路的影响。4.通过细胞转录组高通量测序鉴定miRNA-145-3p和miRNA-145-5p在滋养细胞中的调控网络,筛选潜在的下游基因（HTRA1）进行后续研究。5.通过实时荧光定量PCR和蛋白免疫印迹实验,验证HTRA1在EO-PE胎盘中的表达。转染质粒和siRNA,构建HTRA1过表达和沉默细胞模型;利用CCK-8实验、平板克隆形成实验和Transwell实验检测细胞增殖、迁移和侵袭能力的变化,评估HTRA1对滋养细胞生物学特性的影响;蛋白免疫印迹实验检测EMT通路关键分子蛋白表达水平变化,评估HTRA1对EMT通路的影响;同时转染miRNA-145-3p和miRNA-145-5p的模拟物以及HTRA1质粒,阻断miRNA-145-3p和miRNA-145-5p对HTRA1的负调控作用,平板克隆实验检测细胞增殖能力变化,Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力的变化,评估HTRA1对于miRNA-145-3p和miRNA-145-5p对滋养细胞生物学特性调控作用的影响;蛋白免疫印迹实验检测EMT通路关键分子蛋白表达水平变化,评估HTRA1基因对于miRNA-145-3p和miRNA-145-5p对EMT通路调控作用的影响。【研究结果】1.生物信息学分析鉴定了EO-PE胎盘组织的核心miRNA,即miRNA-145-3p/5p。2.研究发现,miRNA-145-3p在EO-PE胎盘组织中表达减少,体外沉默miRNA-145-3p抑制滋养细胞增殖、迁移和侵袭能力,并抑制滋养细胞EMT转化。3.研究发现,miRNA-145-5p在EO-PE胎盘组织中表达减少,体外沉默miRNA-145-5p抑制滋养细胞增殖、迁移和侵袭能力,并抑制滋养细胞EMT转化。4.细胞转录组高通量测序在miRNA-145-3p和miRNA-145-5p过表达细胞模型中各鉴定了2180和2093个差异基因,HTRA1在两种细胞模型中均下调。5.HTRA1在EO-PE胎盘组织中上调,过表达HTRA1表达抑制滋养细胞增殖、迁移和侵袭能力,抑制滋养细胞EMT转化;miRNA-145-3p和miRNA-145-5p均可负调控HTRA1的表达,HTRA1质粒与miRNA-145-3p或miRNA-145-5p的模拟物共转染可解除miRNA-145-3p或miRNA-145-5p对HTRA1表达的抑制作用,逆转miRNA-145-3p或miRNA-145-5p对滋养细胞增殖、迁移和侵袭的促进作用以及对EMT的促进作用。【研究结论】过表达miRNA-145-3p/5p可能通过负调控HTRA1的表达进而促进控滋养细胞增殖、迁移和侵袭,发挥保护作用。低表达的miRNA-145-3p/5p通过对滋养细胞生物学行为的调控,促进EO-PE的发生发展。