OPB7-1基因的克隆及初步的功能分析

来源 :哈尔滨医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:g348386408
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OPB7-1是该课题组前期工作在肺癌细胞系中获得的存在表达差异的片段.该文通过GenBank数据库检索获得的同源序列设计基因特异性引物,应用RACE方法,从人正常肺组织中调取该片段的3和5末端,获得OPB7-1基因在该组织中的全序列.OPB7-1在肺组织中由于选择性剪接形成两个转录本.染色体定位于1p34.3.利用软件对OPB7-1基因进行开放性阅读框架(ORF)预测,结果显示两个转录本的ORF完全相同,编码202个氨基酸.应用pcDNA.3.1D/V5-His-TOPOR定向克隆载体,通过形成融合蛋白的方法,从实验生物学角度再次证实此假定蛋白定位于胞浆,与生物信息学预测相一致.为了探讨OPB7-1基因在组织与细胞系中的表达情况,应用Northern杂交方法,分析了该基因在正常人12种组织及在9个人非小细胞肺癌细胞系中的表达情况.结果在正常组织中未见明显表达.在3个肺癌细胞系AGZY83-a、Anip973和GLC-82中高表达,而在其它6个肺癌细胞系中表达较低.推断此基因的表达可能与肺癌的发生及演进相关.
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