基于高泌乳素状态探讨丹参化瘀汤对乳腺导管扩张大鼠免疫状态的影响

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实验目的:通过盐酸甲氧氯普胺注射液建立高泌乳素诱导的乳腺导管扩张SD大鼠动物模型,探讨中药丹参化瘀汤对高泌乳素状态下乳腺导管扩张大鼠血清T淋巴细胞及免疫球蛋白水平影响;探讨其作用机制,以期指导临床应用。实验方法:50只雌性未孕SD大鼠以通用鼠料及自来水饲养一星期,随机分为5组10笼,每笼5只,分别标记为空白对照组、模型组、低剂量中药组、中剂量中药组和高剂量中药组,空白组10只SD大鼠予以正常饮食,不做处理,剩余4组SD大鼠连续5天均由皮下注射盐酸甲氧氯普胺注射液,50mg/kg,一天两次。造模成功后,模型组及空白组予以正常饮食喂养,不予干预;3组中药组大鼠连续30天以丹参化瘀颗粒剂冲开灌胃,每天1次,低、中和高剂量组分别给予丹参化瘀颗粒冲剂溶液剂量:7.45g/kg,14.9g/kg,29.8g/kg。第30天灌胃后所有大鼠均禁食24h,深度麻醉大鼠,采集血液样品及乳腺组织标本,用HE染色组织切片后于光镜下观察大鼠乳腺导管的大小分泌物情况。利用流式细胞术检测各组大鼠血清中T淋巴细胞(CD3、CD4、CD8)的表达,用放射免疫法检测大鼠血清中PRL水平,酶联免疫法检测大鼠血清免疫球蛋白(IgM、IgG、IgA)的水平,运用spass22.0进行数据统计、计算并分析结果。实验结果:(1)成功建立高泌乳素状态的SD大鼠动物模型。模型组SD大鼠乳腺导管扩张,导管内存在大量分泌物,导管上皮细胞增生、排列紊乱、小叶腺泡增生;模型组大鼠与空白组大鼠相比较,血清PRL水平显著升高(P<0.01);(2)与空白组相比,模型组大鼠血清免疫球蛋白IgM、IgG、IgA水平均升高(P<0.01);血清T淋巴细(CD3、CD8)表达降低(P<0.01);CD4表达降低(P<0.05)(3)低剂量中药组、中剂量中药组SD大鼠乳腺组织镜下观察,导管的扩张、小叶腺泡的增生及分泌物均有不同程度的改善;高剂量组大鼠镜下观察导管无明显扩张现象,导管结构清晰且细长,导管上皮细胞排列整齐伴轻度增生,导管内无明显分泌物及腺泡增生现象。(4)各中药组大鼠血清中PRL值较模型组低(高剂量、中剂量组P<0.01;低剂量组P<0.05);(5)各中药组大鼠血清中IgA、IgG、IgM值较模型组相比较,均有降低(中剂量、高剂量组P<0.01;低剂量组P>0.05);(6)各中药组大鼠血清中CD3与模型组相比较,均有升高,(高剂量、中剂量组P<0.05;低剂量组P>0.05);(7)各丹参化瘀汤中药组大鼠血清CD4较模型组升高。(高剂量、中剂量、低剂量组P<0.05);(8)各丹参化瘀汤中药组大鼠血清CD8较模型组升高;(高剂量、中剂量组P<0.01;低剂量组P>0.05);研究结论:(1)丹参化瘀汤可降低大鼠血清IgM、IgG、IgA水平;(2)丹参化瘀汤可上调大鼠CD3、CD4、CD8的表达;(3)丹参化瘀汤通过降低泌乳素水平、调节细胞免疫和体液免疫,纠正机体免疫紊乱,具有一定的免疫调节作用。
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