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本文研究目的:研究大鼠肝大部切除后再生过程中HSCs的动态变化、肾结蛋白(Desmin)和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达以及肝肾MMP-2、MMP-9的变化,探讨它们在肝再生中的作用。
研究方法:按Higgins等方法制备肝大部切除动物模型(PH),于术后恢复不同时程取材,免疫组织化学法检测肝HSCs的动态变化和肾Desmin、GFAP的表达,明胶酶谱电泳法检测肝肾中MMP-2、MMP-9的变化。
研究结果:
(1)正常肝小叶内HSCs呈网架状分布,肝大部切除后Desmin阳性HSCs的数量递减。至第6d为正常肝的2/3,术后第14d基本恢复正常。肝大部切除后GFAP阳性HSCs的数量也呈递减趋势,至第5d约为正常肝的2/3,术后第14d基本恢复正常。
(2)肝大部切除后再生过程中,肝脏及肾脏MMP-2、MMP-9均发生了显著变化,肝脏中MMP-2、MMP-9对照组与PH6h组与其它组相比无活性,PH第1d时出现活性,此后一直到PH第14d均保持较强活性;肾脏中PH后proMMP-2、activeMMP-2及proMMP-9在再生后期(PH第7d至PH第14d)均保持较强活力,proMMP-9在对照组、PH第4d也有活性,proMMP-2仅在对照组及PH第3d有活性,其它时段均未见活性。肝脏及肾脏MMP-2、MMP-9在再生后期均保持较强活性。
(3)PH后的再生过程中肾脏Desmin和GFAP的表达显著变化,二者均经历了先减少后恢复的过程。从PH6h开始,肾小球足细胞和间质细胞Desmin和GFAP减少,GFAP阳性反应面积在PH第11d至13d高于对照组,至PH第14d时基本恢复到正常水平,Desmin阳性反应面积在在PH第11d及12d时高于对照组,至PH第14d时基本恢复到正常水平。Desmin和GFAP主要由肾小球足细胞和间质细胞表达。
研究结论:肝再生过程中HSCs的增殖反应较慢,经历了一个由减少到增多到恢复的过程。肾Desmin和GFAP表达模式与肝中HSCsDesmin和GFAP的表达模式相似,肝肾MMP-2及MMP-9表达模式也相似,提示不仅肝HSCs参与肝的再生过程,肾小球足细胞和间质细胞也可能通过一定的方式参与肝的再生,而且肝肾MMP-2及MMP-9表达模式的相似性也提示它们可能共同参与肝的再生过程。