空肠弯曲杆菌耐药性及其主要相关基因的初步分析

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从20世纪70年代起,弯曲杆菌(Campylobacter)在全世界就被普遍认为是引起肠道感染的主要原因,导致严重的感染和被拖延了的肠炎病例、败血症都需要抗生素治疗。而随着抗生素的广泛使用,空肠弯曲杆菌对抗生素的耐药性引起世界的关泛关注,而国内鲜有这方面的报道。本实验从307份鸡盲肠内容物样品中分离到47株空肠弯曲杆菌,并测定这些空肠弯曲杆菌耐药性,结果显示对对喹诺酮类药(环丙沙星)耐药的为31.9%;对氨苄青霉素,克林霉素和红霉素耐药性较高,分别达到85.1%、83.0%和83.0%;而对痢特灵和庆大霉素则较为敏感,敏感度分别为85.1%和74.5%。有89.4%的菌株显示多重耐药性。本实验对47株空肠弯曲杆菌进行RAPD分型,得到5条主条带,分子量在100~1500bp之间,依据该引物扩增产物的电泳谱的差异,将47株空肠弯曲杆菌区分为6个型别Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ。其中Ⅱ型为主株,共14株,占总数的29.8%;Ⅰ型株10,占21.3%;Ⅲ型9株,占19.1%;Ⅳ型9株,占19.1%;V型4株,占8.5%;Ⅵ型1株,占2.1%。本实验没有发现空肠弯曲杆菌基因型与其耐药性之间有明显联系。本实验利用MAMA PCR技术,对获得的47株空肠弯曲杆菌进行检测,结果显示药敏实验检测所得对环丙沙星耐药的15株空肠弯曲杆菌均能通过MAMA PCR检测出其在gyrA基因258位发生点突变,30株对喹诺酮药物敏感的菌株均没有检测出突变。检测正确率高达100%。另外两株对环丙沙星中介的菌株,有一株检测出点突变,经测序验证该点突变确实存在。
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