【摘 要】
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研究了壳聚糖(chitosan,CTS)对不结球白菜叶片氨同化关键酶[谷氨酰胺合成酶(glutamine synthetase,GS)、谷氨酸合酶(glutamate2-oxoglutarate aminotransferase,即 glutamate
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研究了壳聚糖(chitosan,CTS)对不结球白菜叶片氨同化关键酶[谷氨酰胺合成酶(glutamine synthetase,GS)、谷氨酸合酶(glutamate2-oxoglutarate aminotransferase,即 glutamate synthase,GOGAT)和谷氨酸脱氢酶(glutamate dehydrogenase,GDH)]和可溶性蛋白质含量的影响.壳聚糖(CTS)、Ca<2+>、EGTA、异博定(Verapamil,Vp)、La Cl<,3>、氯丙嗪(Chloropromaize,CPZ)和DTT、ATP等单因子及多因子结合处理不结球白菜叶片后,分别对氨同化关键酶GDH和GS的活性产生不同的影响.由于壳聚糖结构的特殊性,因此,它可被用来作为亲和层析的载体.利用这一性质,我们采用壳聚糖亲和层析法从不结球白菜叶片的粗质膜中分离纯化了壳聚糖结合蛋白,并鉴定了其部分生化特性.聚丙烯酰胺凝胶电泳的结果显示只有一条蛋白条带,表示纯化到了单一的壳聚糖结合蛋白.为了探讨壳聚糖调控不结球白菜叶片氨同化关键酶GDH和GS的基因水平.我们应用定量RT-PCR技术检测了壳聚糖对不结球白菜叶片GDHmRNA和GSmRNA水平的影响,结果表明壳聚糖处理后,GDHmRNA含量上升,且GDHmRNA含量的变化与GDH活性的变化趋势基本一致;而GSmRNA的量基本恒定,并未与GS的活性变化相一致.以上结果初步表明,壳聚糖可能在转录水平上对氨同化关键酶GDH进行调控;而对GS的调控则不在转录水平上,可能发生在其翻译后水平上.
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