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目的: 研究小豆蔻明和三七皂苷Ft1(Ft1)对人乳腺癌细胞增殖、凋亡和转移的影响及其作用机制。 方法: CCK-8法检测细胞活力;EdU染色法检测细胞的增殖;Hoechst33258染色检测细胞凋亡;单细胞迁移实验检测细胞迁移能力;构建移植瘤动物模型;包装慢病毒感染细胞构建稳定株;QPCR法检测mRNA含量;Western blotting法检测蛋白表达。 结果: (1)小豆蔻明能够降低人乳腺癌细胞的细胞活力和增殖能力,促进细胞凋亡和上调促凋亡蛋白Cleaved caspase3和Bax,下调抗凋亡蛋白Bcl-2的蛋白表达,抑制乳腺癌移植瘤的生长,并抑制乳腺癌细胞的迁移能力,但在抗癌有效剂量下不影响正常乳腺细胞S1的增殖能力。进一步研究发现,在正常和缺氧条件下,小豆蔻明均可明显下调乳腺癌细胞中HIF-1α的mRNA水平和蛋白水平,也能显著降低HIF-1α的转录调控活性;乳腺癌细胞中过表达HIF-1α可以显著减弱小豆蔻明的抑制乳腺癌细胞增殖作用;小豆蔻明能够下调HIF-1α调控的靶基因(能量代谢)Gult1、Gult3、Gult4、MCT4、LDHA、LDHB和PDK1的表达,同时抑制增殖/凋亡相关靶基因IGF2、IGF BP1、TGF-β3、RTP801、VEGF、cyclin G2的基因表达;小豆蔻明能够抑制p-PI3K、p-AKT、p-mTOR、p-p70S6K、p-ERK、p-p38 MAPK和p-JNK的蛋白表达。 (2) Ft1能降低MDA-MB-231和MCF-7的活力,抑制MDA-MB-231和BT-549的增殖。Ft1也可诱导MDA-MB-231细胞核DNA高度聚集,并且在作用12h后,下调HIF-1α和Bcl-2,上调cleaved caspase-3蛋白表达。进一步研究发现,Ft1在降低HIF-1α蛋白表达的同时,显著减少p-Akt、p-mTOR、p-p70S6K及p-ERK1/2的蛋白表达,但增加p-JNK蛋白水平。Ft1能够显著抑制EGFR的Tyr1068和Ser1046/1047两个位点的磷酸化。在不影响HS578T细胞活力的浓度下,Ft1能够显著抑制其迁移路径长度和速度。 结论: (1)小豆蔻明可能通过对AKT/mTOR/p70S6K和MAPK两条信号通路的双重抑制,下调HIF-1α蛋白表达,进一步通过抑制HIF-1α介导的糖酵解作用,最终抑制乳腺癌细胞增殖和促进细胞凋亡。 (2) Ft1可能通过对AKT/mTOR/p70S6K和MAPK(ERK1/2)两条信号通路的双重抑制,下调HIF-1α蛋白表达,从而抑制Bcl-2的蛋白表达,促进cleaved caspase3的蛋白表达,最终抑制乳腺癌细胞增殖和促进细胞凋亡,并在抑制肿瘤生长的同时抑制肿瘤的转移。