TELFA法与离心法获取脂肪浓缩移植物的生物学及组织再生机制的对比研究

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研究背景和目的自体脂肪移植是临床常用的一种人体组织填充,目前抽脂后用于移植的脂肪组织处理方法多种多样,但移植后的保留率仍然不可预测。因此本研究通过对采用Telfa法进行的颗粒筛选获得的大颗粒脂肪(Macro Fragment Fat,MFF)和经离心法进行密度筛选获得的高密度脂肪(High Density Fat,HDF)进行对比观察,分析两者成分及移植后的转归差异。拟为基础研究中脂肪再生的机制及临床上脂肪移植提高保留率提供帮助。方法1、实验组脂肪组织采用Telfa法原理进行处理收集MFF,对照组脂肪组织进行离心处理作为HDF,将MFF与HDF进行生物学性状的对比。2、分别将MFF、HDF移植入裸鼠背部,定时取材,通过对比观察MFF与HDF移植后的大体与体积,以及进行组织学分析。3、将 MFF、HDF、富含血管生成因子的颗粒(Angiogenesis factor-rich particle,ARPs)和MFF+ARPs注射到裸鼠皮下组织,在移植后第1、2、3天,观察ARPs组的移植物发现其已被完全吸收。在移植的第1、2、3个月,取其他三组移植物进行大体与体积对比,并进行组织学染色、电子镜扫描和蛋白免疫印迹分析。结果1、通过实验发现,HDF的密度高于MFF的密度,伊红染色法显示MFF的结构比HDF更脆弱。免疫荧光染色显示,MFF比HDF有更多的大尺寸脂肪细胞。扫描电镜检查也显示MFF的结构比HDF更脆弱,MFF中脂肪细胞的大小比HDF大。荧光图定量分析显示,MFF中脂肪细胞的大小水平高于HDF。脂肪细胞直径的定量分析也显示了 MFF高于HDF。2、分别将MFF、HDF移植入裸鼠背部,在移植后第1、2、3个月分别对2组裸鼠的脂肪移植物进行对比观察发现,HDF的脂肪移植物的体积保存高于MFF。进行的HE染色观察到MFF中可见更多的纤维化及油囊,移植后早期MFF的炎症反应较高;而HDF的组织结构更为健康,炎症反应低,油囊少。利用免疫荧光法对比发现,HDF可在移植早期见到很多血管生成;MFF的血管密度在整个移植后的期间均较低。3、在进一步的研究中发现了大颗粒脂肪废弃液(MFF-DC)中的ARPs,血管生成因子VEGFA、PDGFB在ARPs中的表达非常高,是MFF的数十倍。实验表明MFF的血管生成和长期保留率均低于HDF。MFF+APRs组的移植物保留率增加,这个结果与HDF组相似,因此ARPs可以提供高浓度的血管生成因子,可以促进脂肪组织早期的血管生成,能够提高脂肪组织移植后的长期保留率。结论ARPs是一个独特的发现,它可以提供高浓度的血管生成因子,包括VEGFA和PDGFB,这些可以促进脂肪组织早期的血管生成,能够提高脂肪组织移植后的长期保留率。根据ARPs的物理和化学特性,其可能在协助脂肪移植,促进伤口愈合,治疗面部疤痕、颈部皱纹等领域中发挥有效作用。
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