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近年来上海市分子男科学重点实验室克隆到一个附睾特异性表达基因Ces7(Rat615; R615),经序列分析表明,RAT615在氨基酸组成上与羧基酯酶(CEs)有大约50-60%的同源性,Rat615氨基酸序列中包含羧基酯酶家族(丝氨酸水解酶)中所有的保守序列,与已发现的CES7家族成员具有超过70%的同源性。在前期的工作已发现Rat615mRNA和蛋白在附睾中特异性转录和表达,主要在附睾体部和尾部表达并分泌至附睾管腔中。实验已表明,Rat615蛋白具有胆固醇酯酶的活性。本文利用RNAi技术上进一步研究了Rat615基因的功能。方法：首先在细胞水平上筛选能够敲低Rat615表达(nt807-825和nt1878-1896)的有效siRNAs片段,然后以慢病毒为载体,在体外构建能够表达有效siRNAs载体,将其包装为重组病毒,用包装好的病毒去感染HEK293T细胞,感染后2d,用流式细胞仪及荧光显微镜检测病毒的滴度。然后将重组好的病毒注入大鼠附睾的尾部,在感染后10d后检测Rat615蛋白表达、精子获能的情况。结果：1、在细胞水平上成功筛选到两条能够敲低Rat615表达的siRNA1、siRNA2,并构建了能够表达siRNA1和siRNA2病毒载体,成功制备了Lenti/siRNA1-Rat615、 Lenti/siRNA2-Rat615以及对照Lenti/siRNA-GFP病毒。2、病毒感染大鼠附睾尾部10d后,附睾尾部中Rat615蛋白以及管腔中Rat615蛋白的含量与对照组的相比明显的下降。精子的获能也得到了抑制。经结果表明,Rat615在精子运动、获能中发挥重要调节作用。所以本研究可以进一步利用RNAi敲低Rat615的动物模型来探讨Rat615的作用机制。