【摘 要】
：
小儿肺炎是一种3岁以下婴幼儿常见呼吸道疾病。由于患儿的免疫功能不健全,使得小儿肺炎成为造成3岁以下幼儿死亡病因之首。小儿肺炎的致病原因较复杂,肠道致病菌是致病因素之一,但对于肠道细菌如何致病的机制仍然需要深入研究。本课题组前期已经从小儿肺炎患儿肠道内分离出一种屎肠球菌（Enterococcus faecium）,通过小鼠实验确认了该细菌的致病性。屎肠球菌是一种革兰氏阳性球菌,根据文献报道,其毒力因
论文部分内容阅读
小儿肺炎是一种3岁以下婴幼儿常见呼吸道疾病。由于患儿的免疫功能不健全,使得小儿肺炎成为造成3岁以下幼儿死亡病因之首。小儿肺炎的致病原因较复杂,肠道致病菌是致病因素之一,但对于肠道细菌如何致病的机制仍然需要深入研究。本课题组前期已经从小儿肺炎患儿肠道内分离出一种屎肠球菌（Enterococcus faecium）,通过小鼠实验确认了该细菌的致病性。屎肠球菌是一种革兰氏阳性球菌,根据文献报道,其毒力因子主要为表面蛋白、脂磷壁酸和胞外产物等,本实验使用来自健康幼儿肠道的屎肠球菌（正常菌）作为对照,检测致病性屎肠球菌（致病菌）中不同的毒力因子,探究何种毒力因子损伤了小鼠肠道屏障并最终导致小鼠肺炎。目的:从正常菌和致病菌中分别提取三种毒力因子,经小鼠腹腔注射,检测相关器官的病理学、免疫学、微生物学指标,以确定产生小鼠肺炎的主要致病因子,及其可能的作用机制。方法:分别从正常菌与致病菌中提取三种独立因子:利用热-酚法提取脂磷壁酸、用溶菌酶-高浓度氯化锂方法提取表面蛋白;用平板-玻璃纸法提取胞外产物。使用56只雄性、三周龄的BALB/C小鼠作为实验动物,随机分成7组（每组8只）:正常组、正常菌表面蛋白组（常蛋白组）、致病菌表面蛋白组（病蛋白组）、正常菌脂磷壁酸组（常壁酸组）、致病菌脂磷壁酸组（病壁酸组）、正常菌胞外产物组（常产物组）、致病菌胞外产物组（病产物组）。调整各种提取物浓度为2mg/kg每日腹腔注射,正常组每日腹注同样量的生理盐水。于第8天时无菌条件下处统一死小鼠,留取血液、粪便、肺、肠组织等,进行免疫、病理、微生物及生化检测。采用HE染色法,评估肠肺的损伤情况;采用RT-PCR法检测小鼠肺组织中炎症因子IL-10和IL-6的表达情况;将小鼠的部分血液分离出血清利用ELISA检测抗炎因子IL-10和促炎因子IL-6的表达;采用流式细胞技术检测肠及肺组织细胞悬液和血液中的免疫细胞种类及数量;采用Western botting和免疫组化技术检测小鼠肠道紧密连接蛋白OCC、CLDN1和黏蛋白Muc-2的表达;采用16Sr RNA高通量测序技术检测小鼠肠道菌群的丰度与多样性的变化。采用红外光谱技术,对来自于正常屎肠球菌和致病屎肠球菌的脂磷壁酸分别进行结构分析,以确定该两种脂磷壁酸在结构上的不同。结果:病理学HE切片染色结果显示,病壁酸组的小鼠肺组织及肠道组织破坏严重,证明致病菌脂磷壁酸是造成小鼠肺部病变及肠道损伤的主要毒力因子。对小鼠肺部炎症因子IL-10、IL-6的检测也显示,病壁酸组的表达量明显高于其它组。对小鼠的血液、结肠、肺组织免疫细胞的流式检测结果显示,病壁酸组小鼠T、B、ILC-2s淋巴细胞明显激活,免疫细胞种类和数量增加。这些结果均指向,致病屎肠球菌脂磷壁酸是造成小鼠肺部产生炎症的毒力因子。肠道的机械屏障和化学屏障是小鼠肠屏障的主要组成部分。对于小鼠肠黏膜的检测结果显示,病壁酸组的小鼠肠紧密连接蛋白OCC、CLDN1和黏蛋白Muc-2表达量明显下降,提示小鼠肠道的机械屏障受损,通透性提高,化学屏障也受到损伤。对于小鼠肠道菌群的结构分析显示,病壁酸组的小鼠肠道菌群丰度和多样性相较于其他组明显下降,导致该组小鼠肠道菌群结构严重失衡,肠道生物屏障受到破坏。最后,对于脂磷壁酸的红外光谱结构分析结果显示,来自于致病屎肠球菌的脂磷壁酸与来自于正常屎肠球菌的脂磷壁酸具有不同的化学结构。结论:1.致病屎肠球菌脂磷壁酸是导致小鼠产生肺炎的主要致病因子。2.该脂磷壁酸能够破坏肠屏障,造成小鼠肺部的炎症反应。3.该脂磷壁酸具有独特的化学结构,这种结构可能与该致病菌的感染性有关。
其他文献
背景和目的脊髓损伤（spinal cord injury,SCI）是由于各种原因所致的脊髓神经细胞死亡,从而造成轴突断裂以及神经脱髓鞘反应,最终结果使神经功能传导受阻、机体感觉和运动功能障碍,是一种中枢神经系统疾病,对患者身心健康以及日常生活活动造成严重伤害和极大负担。目前尚无有效的治疗方法。研究发现,氧化应激（Oxidative stress,OS）在SCI的病理生理过程中发挥重要作用。氧化应激
研究目的:研究YAG激光治疗PVD型飞蚊症的长期有效性及安全性,并分析影响其疗效的相关风险因素。研究方法:回顾性研究。收集2019年1月至2020年12月在沈阳何氏眼科医院诊断为PVD型的飞蚊症患者,根据患者的眼部情况及治疗意愿将所有患者分为YAG激光治疗组（研究组）及对照组（无干预措施）。纳入研究的资料包括:年龄、性别、屈光状态、激光次数、患者自诉“飞蚊”形态（点状为主、线状为主或片状为主）及“
膀胱癌属于泌尿生殖系统恶性疾病,其发病具有明显的性别差异,分别位于男性发病率的第4位,女性发病率的第11位。吸烟是导致膀胱癌发病率增加的主要暴露因素。膀胱癌根据其局部浸润程度可分为肌肉浸润性膀胱癌（MIBC）和非肌肉浸润性（NMIBC）,而MIBC比较常见且多为乳头状。临床上治疗膀胱癌常采取膀胱癌切除术和卡介苗联合治疗,但仍具有预后不良和术后并发症严重等问题,因此寻找膀胱癌新的分子靶点具有重要意义
背景与目的:女性不孕症的发病率逐年增加。子宫内膜接受态的建立是胚胎成功植入的关键,其功能障碍是导致女性不孕症的重要原因之一。人类子宫内膜的周期性变化一般以增生期、分泌期以及月经期为一个循环,子宫内膜处于分泌中晚期时接受态最高。子宫内膜上皮细胞的阶段特异性表达由多种因素参与调控,包括离子通道、蛋白糖基化修饰及黏附分子等。电压门控Na+通道（Voltage-gated sodium channel,V
研究背景:中心法则提出遗传信息的传递是由DNA转录成RNA,RNA经过翻译成蛋白质,发挥生物学功能。在这个过程中,遗传信息还完成了从细胞核进入细胞质的过程,即RNA的转运出核。基因表达调控是一个十分精确又保守的过程:主要分为转录调控、RNA加工、RNA转运、翻译调控和蛋白质降解。其中RNA的转运出核在这个过程中起到承上启下的作用,RNA转运出核异常会导致多种疾病的产生,如肿瘤的侵袭和迁移、神经退行
目的:根据视网膜疾病患者532nm氩离子视网膜激光术后主观问卷和客观检查的观察,探讨视网膜疾病激光术后眼表状态变化及其可能原因。方法:本研究为前瞻性研究,选取2021年3月-2021年6月在沈阳何氏眼科医院诊断为视网膜疾病并进行532nm氩离子视网膜激光光凝术的患者,根据眼底疾病分为A组和B组;A组患者诊断为增殖性糖尿病视网膜病变（proliferative diabetic retinopath
目的:研究PDR（proliferative diabetic retinopathy,增生性糖尿病性视网膜病变）行PPV（pars plana vitrectomy,玻璃体切割术）术后发生NVG（neovascular glaucoma,新生血管性青光眼）的相关风险因素。方法:单中心回顾性研究。收集2015年7月-2020年9月于沈阳何氏眼科医院确诊为PDR并初次行23G玻璃体切割术治疗的连续患
本文分析了当前事业单位合同管理现状及存在的问题，从内控建设的全面性、重要性、制衡性、适应性和有效性原则出发，针对性地提出了强化合同管理意识、规范合同审批流程、加强合同预算管理、提升合同管理信息化水平、建立健全合同管理绩效评价机制等对策建议。
可德兰（Curdlan）是由微生物（Alcaligenes faecalis var.myxogenes）发酵产生的直链β-1,3-葡聚糖。可德兰及其衍生物具有辅助抗菌、增加机体免疫力、辅助降血糖、降血脂、改善胃肠功能等生物活性,是一种极佳的生物效应调节剂。可德兰有在水中溶性差、分散度低、溶解条件苛刻的缺点,在某种程度上限制了其广泛应用。通过对羟基化学修饰将不同类型的基团或离子引入到可德兰分子链上
目的:目前乳腺癌仍是全球女性发病率最高的癌症,其发生发展与HIPPO通路密切相关,但乳腺癌中HIPPO通路的调控机制有待于深入研究。LATS1作为HIPPO通路中核心成员通过磷酸化YAP/TAZ,抑制下游靶基因转录进而发挥抑癌作用。Suppressor of fused homolog（SUFU）是Hedgehog（Hh）通路的重要组成部分,通过参与细胞内多种信号通路的调控进而控制肿瘤的发展进程。