【摘 要】
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目的:探讨CD8~+CIK细胞亚群表面T细胞受体(TCR)和NK细胞抗原识别受体(NKG2D抗原识别受体)在发挥抗肿瘤免疫效应中的功能。方法:采用磁珠细胞分选(MACS)技术从培养1周的细胞因
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目的:探讨CD8~+CIK细胞亚群表面T细胞受体(TCR)和NK细胞抗原识别受体(NKG2D抗原识别受体)在发挥抗肿瘤免疫效应中的功能。方法:采用磁珠细胞分选(MACS)技术从培养1周的细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)中富集CD8~+亚群并继续培养扩增,获得高度均质性的CD8~+CIK细胞后进行表型检测。将CD8~+CIK细胞分别在CD3抗体和NKG2D抗体包被的培养板中进行培养,以CD137为CD8~+CIK细胞激活标志物,应用流式细胞技术(FCM)检测CD137表达,评估CD8~+CIK细胞的激活状况。选用红白血病细胞株HLA~-MICA/B~+K562细胞作为CD8~+CIK细胞作用的靶细胞,应用NKG2D抗体阻断NKG2D与MICA/B相互作用,测试激活的CD8~+CIK细胞在NKG2D阻断状态下对靶细胞K562的杀伤能力。结果:TCR能够提供CD8~+CIK细胞的激活信号,而NKG2D不具备该功能。CD8~+CIK细胞对K562细胞具有杀伤功能,即能够以HLA非限制的方式杀伤靶细胞。而在CD3-TCR复合物激活的CD8~+CIK细胞上阻断NKG2D与MICA/B相互作用后,CD8~+CIK细胞杀伤活性受到抑制。结论:CD8~+CIK细胞的激活主要通过CD3-TCR受体复合物,而非通过NKG2D受体。然而CD8~+CIK细胞的NKG2D受体与靶细胞表面相应配体结合后可以介导HLA非限制的抗癌功能。
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