【摘 要】
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在本论文中,我们应用行为药理学,在体单细胞胞外记录,离体单细胞全细胞膜片钳记录以及钙成像等技术对蜜蜂毒肽的生物学作用及其机制进行了研究。定量研究发现皮下分别注入蜜
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在本论文中,我们应用行为药理学,在体单细胞胞外记录,离体单细胞全细胞膜片钳记录以及钙成像等技术对蜜蜂毒肽的生物学作用及其机制进行了研究。定量研究发现皮下分别注入蜜蜂毒肽和蜜蜂毒可产生相似的剂量依赖性的注射足肿胀和血浆渗出等炎性改变。H-E染色发现皮下注入蜜蜂毒肽和蜜蜂毒后外周皮下血浆渗出物明显增多。
我们应用一些脂质代谢途径中关键酶的抑制剂来观察脂质代谢是否参与蜜蜂毒肽诱致的热痛敏,从而来验证蜜蜂毒肽是否可能通过间接途径来调节TRPV1。
行为学和在体电生理的结果证实蜜蜂毒肽可以诱致痛和痛敏。而DRG细胞是外周伤害性刺激传入第一级神经元,因此我们在离体的DRG细胞上进一步观察蜜蜂毒肽的作用来阐明其作用机制。
应用钙成像的技术发现,TRPV1的非选择性拮抗剂Ruthenium red(1μM)也可以明显抑制蜜蜂毒肽诱发的胞内钙水平的升高。这个结果表明蜜蜂毒肽开放的细胞上非选择性阳离子通道就是TRPV1。
进一步探讨了脂氧合酶和环氧合酶在蜜蜂毒肽诱发的内向电流中的作用。 蜜蜂毒肽可以通过激活磷脂酶A2-脂氧合酶代谢途径并在胞内蛋白激酶A、C的协助下调节TRPV1开放,引起皮下注入蜜蜂毒肽后行为学上表现的持续性自发痛和热痛敏。
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