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目的模拟牙周炎致病因子对脂肪细胞致炎的过程,在体外培养3T3-L1前脂肪细胞、诱导其向脂肪细胞分化,以牙龈卟啉单胞菌脂多糖Pg-LPS作用于脂肪细胞,观察Pg-LPS对脂肪内质网应激反应标志物GRP78、XBP1s的mRNA表达水平的影响,研究Pg-LPS对脂肪细胞内质网应激状态的影响,从而为进一步揭示牙周炎、脂肪组织炎症,与胰岛素抵抗和糖尿病发生发展的关系奠定理论基础,和为临床上治疗、预防提供理论依据。方法1、诱导3T3-L1前脂肪细胞向脂肪细胞分化,油红o染色鉴定细胞分化状态;2、将脂肪细胞分为空白对照组,LPS处理组两组;空白对照组:加入等体积0.8%的牛血清白蛋白的无血清DEME培养液,7个时间点0,30min,1h,2h、4h、8h、12h取样;LPS处理组:又分为4组,分别加入含有50ng/ml、100ng/ml、500ng/ml、1000ng/ml 4个作用浓度的Pg-LPS和0.8%的牛血清白蛋白的无血清DEME培养液,分别处理细胞7个时间点0,30min,1h,2h、4h、6h、12h取样;real-time PCR检测内质网应激反应标志物GRP78、XBP1s的mRNA表达水平;结果1、诱导分化14d后,细胞在镜下均可看到明显脂滴,3T3-l1前脂肪细胞基本分化为脂肪细胞;2、加Pg-LPS 12小时后,对照组除个别死亡细胞漂浮未见明显细胞凋亡情况,50ng/ml、100ng/ml、500ng/ml、1000ng/ml实验组与对照组相比,实验组各组均出现小面积细胞的凋亡细胞漂浮和团块集聚的情况;3、0-12h,对照组GRP78 mRNA表达水平均维持在较为恒定的基线水平;而实验组GRP78表达水平各浓度实验组均在加Pg-LPS干预早期,均出现比基线水平明显的抬高,而到达峰值后回落至靠近基线水平上下:50ng/ml组在作用30min后表达水平逐步抬高,在1h时表达量达到峰值,于靠近2h时间点回落至接近基线水平;100ng/ml组在0-1h间GRP78 mRNA相对表达量逐步出现抬高,1h-2h明显上抬达到峰值后于4h回落至基线水平附近。500ng/ml组在30min达到峰值后逐步回落,在接近2h时间点回落至基线水平。1000ng/ml组在0-1h间GRP78mRNA相对表达量逐步出现抬高,1h上抬达到峰值后于2h回落至基线水平附近。4、0-12h,对照组XBP1s mRNA表达水平均维持在较为恒定的基线水平;而实验组GRP78表达水平各浓度组均在加Pg-LPS干预早期,出现比基线水平明显的抬高而到达峰值后回落至靠近基线水平:50ng/ml组在作用30min后表达水平逐步抬高,在1h时表达量达到峰值,于靠近2H时间点回落至基线水平以下;100ng/ml组在0-1h间XBP1s mRNA相对表达量逐步出现抬高,1h-2h明显上抬达到峰值后于4h回落至基线水平附近。500ng/ml组在30min达到峰值后逐步回落,在接近1h时间点回落至基线水平。1000ng/ml组在0-1h间XBP1s mRNA相对表达量逐步出现抬高,1h上抬达到峰值后于2h回落至基线水平附近。结论:1、Pg-LPS可上调脂肪细胞内质网应激反应水平,显著升高脂肪细胞GRP78、XBP1s mRNA表达水平;2、GRP78、XBP1s mRNA表达水平和Pg-LPS作用的浓度和时间不存在相关性;3、Pg-LPS可能通过内质网应激,启动脂肪细胞的凋亡机制;