长角血蜱两性生殖和孤雌生殖种群线粒体基因组及卵巢发育相关基因的比较研究

来源 :河北师范大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:yoyoyu2008
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长角血蜱Haemaphysalis longicornis是一种专性吸血的体外寄生虫,广泛分布于澳大利亚、新西兰和东亚等地区。在我国,长角血蜱是华北地区的优势种之一,具有极强的繁殖扩散能力,包括两性生殖种群(H.longicornis bisexual population,HLBP)和孤雌生殖种群(H.longicornis parthenogenetic population,HLPP),对其繁殖机制和种群特性的深入比较研究具有重要的科学意义。本文对HLBP和HLPP线粒体基因组进行测序和比较分析,发现两个生殖种群在基因结构、数量和位置上无明显变化。系统发育分析显示,HLBP和HLPP的分化水平较低,亲缘关系紧密,遗传距离小于亚种水平。线粒体蛋白编码基因的定量分析显示,在HLBP和HLPP不同发育时期线粒体基因的转录模式存在明显差异,但遗传序列的研究结果依然支持两个生殖种群隶属同一物种。为从分子水平阐明长角血蜱卵巢发育相关的基因功能,对HLBP和HLPP不同吸血时期的卵巢进行转录组测序。分析结果显示,参与卵巢发育功能的基因主要集中在细胞分化、组织发育、信号转导、翻译修饰、脂类代谢、催化活性和生物代谢等相关通路。对HLBP和HLPP不同发育时期的差异表达基因进行分析,均发现氧化磷酸化、MAPK信号通路、泛素蛋白酶途径、丝裂原活化蛋白激酶等与细胞分化、蛋白质降解和器官发育等相关通路的重要基因明显上调,这些基因可能参与长角血蜱卵巢发育早期的重要生理代谢过程。对比两个生殖种群之间的差异表达基因,发现差异基因主要富集在PI3K-Akt信号通路、ABC转运蛋白、cAMP信号通路等多个信号通路,表明在HLBP和HLPP卵巢发育过程中一些细胞信号转导机制可能发生了功能变化,卵巢发育和卵子发生等关键的生物学过程中在两种生殖模式中发生了可遗传的转录差异。以上研究结果有助于深入了解HLBP和HLPP生殖调控相关基因的遗传背景和分子机制。在转录组分析基础上利用定量蛋白质组学对长角血蜱卵巢蛋白进行研究,结果发现参与卵巢发育的蛋白与转录组筛选到的基因功能和通路相关性较强,这些数据为深入研究蜱类卵巢发育相关蛋白的功能提供了理论基础。通过定量PCR对转录组和蛋白质组筛选的差异表达基因进行验证,结果表明筛选出基因的表达趋势较为可靠,在HLBP卵巢中发现组织蛋白酶L、分泌蛋白、糖苷酶等蛋白在吸血过程中明显上调,HLPP中发现溶菌酶、卵黄原蛋白、热激蛋白、谷胱甘肽S转移酶、肌球蛋白和ATP合酶等蛋白表达上调,表明这些基因可能在长角血蜱吸血时期卵巢的早期发育、物质运输、能量代谢和氧化应激反应等作用中发挥了重要功能,为后续揭示长角血蜱卵巢发育相关基因的分子机制和不同生殖种群卵巢基因的功能差异提供重要科学依据。
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