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背景与目的:面神经是第7对脑神经,主要是运动神经,支配面部特定区域的肌肉运动及腺体分泌。面神经受损后会产生面瘫等复杂的临床状况。自噬在脊髓等神经损伤后具有保护作用已被证实,但是利用面神经损伤模型进行自噬方面的研究相对较少,本课题的研究目的是对于面神经损伤后,自噬在面神经元存活过程中的作用机制的初步探讨。方法:选择60只SD大鼠,体重均在200-250 g之间,分为三组,根据SD大鼠体重,腹腔注入麻醉剂,暴露SD大鼠的面神经主干将其切断,隔天用雷帕霉素及三甲基腺嘌呤分别对SD大鼠进行腹腔注射。根据SD大鼠的体重计算所需药物浓度,雷帕霉素的注射浓度为0.5 mg/kg,三甲基腺嘌呤的注射浓度为2.5 mg/kg。选取4 h,1 d,3 d,7 d,14 d5个时间点,每时间点取四只SD大鼠的脑干组织,由HE染色确定脑干内面神经核团区面神经元数量。免疫组化染色观察自噬标志物LC3,Beclin 1,Bcl-2,P62的表达情况。结果:1.HE染色结果显示面神经损伤侧的面神经核团区神经元存活率均值±标准差分别是4 h-98.5%±1.40%,1 d-93.77%±2.45%,3 d-84.47%±4.52%,7 d-79.87%±1.10%,14 d-60.60%±3.25%。损伤侧神经元数量总体呈下降趋势,即面神经损伤后面神经元存活率下降（p＜0.05）。面神经损伤后面神经元存活率4h时下降,14 d时降低趋势延续。2.免疫组化相对定量分析显示面神经损伤侧及未损伤侧在不同时间点面神经核区自噬相关蛋白LC3,Beclin 1,Bcl-2,P62的表达水平如下:2.1对照组面神经损伤侧面神经核区LC3不同时间点表达量均值±标准差为4h-1.05±0.20,1 d-1.85±0.37,3 d-2.30±0.66,7 d-3.20±0.40,14 d-2.45±0.76。未损伤侧4 h-0.75±0.40,1 d-0.75±0.55,3 d-0.90±0.31,7 d-0.80±0.40,14 d-0.85±0.49。4h后损伤侧LC3表达量均明显高于未损伤侧（p＜0.05）。2.2对照组面神经损伤侧面神经核区Beclin 1不同时间点表达量均值±标准差为4 h-1.35±0.60,1 d-2.05±0.50,3 d-3.40±0.94,7 d-2.85±1.27,14 d-2.30±1.22。未损伤侧4 h-0.40±0.60,1 d-0.70±0.70,3 d-0.50±0.60,7 d-0.60±0.50,14 d-0.30±0.50。各时间点损伤侧Beclin 1表达量均明显高于未损伤侧（p＜0.01）。2.3对照组面神经损伤侧面神经核区Bcl-2不同时间点表达量均值±标准差为4h-5.45±1.19,1 d-5.10±1.02,3 d-4.85±0.59,7 d-3.55±1.32,14 d-3.65±1.09。未损伤侧4 h-5.30±1.17,1 d-5.55±2.28,3 d-5.65±1.09,7 d-6.10±1.33,14 d-5.65±0.49。4 h和1 d这两组时间点损伤侧和未损伤侧相比统计学差异不显著（P＞0.05）,其余各时间点对比统计学差异显著（p＜0.05）。从3 d开始损伤侧Bcl-2表达量明显低于未损伤侧。2.4对照组面神经损伤侧面神经核区P62不同时间点表达量均值为4 h-6.20±1.20,1 d-5.30±1.45,3 d-4.95±0.51,7 d-3.25±0.55,14 d-3.33±0.98。未损伤侧4 h-6.10±1.02,1 d-6.75±1.29,3d-6.20±0.83,7 d-6.95±1.32,14 d-6.00±1.21。4 h损伤侧和未损伤侧比较统计学差异不显著（p＞0.05）,其余各时间点统计学差异显著（p＜0.05）。自1 d后损伤侧P62表达量均低于未损伤侧。2.5综上所示除4h,1d时损伤侧面神经核区自噬相关蛋白Bcl-2,4h时P62表达与对照组相比不显著外（p＞0.05）,损伤侧其他时间点自噬相关蛋白表达与未损伤侧相比均有显著差异（p＜0.05）,说明面神经损伤后自噬被激活。3.自噬激活组,对照组与自噬抑制组相比较,面神经核区LC3各时间点均有显著差异（p＜0.05）。Beclin 1在4 h时三组对比差异不显著（p＞0.05）,1 d,14 d时对照组与抑制组比较差异不显著（p＞0.05）,其余各组对比均有显著差异（p＜0.05）。Bcl-2在4 h时三组比较差异不显著（p＞0.05）,1 d时对照组与抑制组比较差异不显著（p＞0.05）。其余各组比较均有显著差异（p＜0.05）。P62在1 d时三组间比较差异不显著（p＞0.05）,1 d,3 d时对照组与抑制组比较差异不显著（p＞0.05）。其余各时间点各组比较均有显著差异（p＜0.05）。综合分析以上结果说明自噬激活组受到激活剂的调节自噬活性升高,自噬抑制组受抑制剂的调节自噬活性降低。4.激活组和抑制组进行HE染色,结果与对照组进行对比,雷帕霉素激活组与对照组相比,面神经核团内神经元存活率从1 d开始明显提高,第7 d时提高最为显著。三甲基腺嘌呤抑制组与对照组相比,面神经元存活率从1 d开始下降,第7 d时下降最为显著。4h,14d时间点三组间比较统计学差异不显著（p＞0.05）,其余各时间点统计学差异显著（p＜0.05）。说明损伤后的早期增强自噬有助于面神经元存活。结论:1.面神经损伤后,在损伤侧的面神经核团区域观察到自噬流的增强。2.面神经损伤早期,面神经元中自噬流的增强对其具有保护作用,进一步增强自噬可一定程度上提升面神经元的存活率。