目的：　　本研究旨在利用中脑多巴胺能细胞株MES23.5细胞阐明Parkin对鱼藤酮毒性损伤的保护作用，并通过研究Parkin对鱼藤酮诱导的多巴胺能细胞内自噬流障碍和细胞凋亡的影响揭示Parkin参与氧化应激条件下多巴胺能神经细胞生存的可能机制。　　方法：　　通过慢病毒感染的方法，构建稳定过表达Parkin的MES23.5细胞系（MES/PKN），并采用Western blot法和RT-PCR法检测Parkin的蛋白水平和mRNA水平。通过对细胞存活率的检测选择合适的鱼藤酮浓度和作用时间，构建鱼藤酮致帕金森细胞模型。鱼藤酮处理MES/PKN与MES23.5，观察细胞存活率的不同变化；使用DHE荧光探针，比较细胞内ROS的产生情况；检测细胞内ATP的水平以及线粒体膜电位的改变；Western blot法检测两种细胞内Lamp 2a、p62和LC3 Ⅱ蛋白水平变化以及AMPK和pAMPK的蛋白水平变化；用细胞免疫荧光方法，观察细胞内微管解聚程度的变化；通过流式细胞技术检测细胞凋亡水平的变化情况。在鱼藤酮处理的MES/PKN中加入NADPH，采用上述方法观察细胞存活率的变化、细胞内ROS的产生情况、细胞内ATP的水平、线粒体膜电位的下降情况、细胞凋亡水平的变化情况以及细胞内Parkin蛋白水平的变化情况。　　结果：　　从Parkin的蛋白表达水平和mRNA水平可以判断，我们成功构建了稳定表达Parkin的MES23.5细胞系（MES/PKN）。根据鱼藤酮对MES23.5细胞的毒性作用具有浓度和时间依赖性特点，我们选择20 nM和500 nM的鱼藤酮作用细胞24 h制作高、低剂量两种帕金森细胞模型。细胞活力检测结果显示Parkin可以部分减轻鱼藤酮对MES23.5细胞造成的损伤，能抑制鱼藤酮引起的ROS释放和线粒体膜电位的下降，但是对细胞内ATP的水平没有明显的作用。通过自噬溶酶体通路相关实验，我们发现鱼藤酮能上调LC3Ⅱ和p62蛋白，下调Lamp 2a蛋白，说明鱼藤酮诱导了溶酶体的损伤，导致了细胞自噬流障碍。而在MES/PKN中，Parkin并不能有效缓解鱼藤酮所诱导产生的自噬流障碍。有趣的是，我们发现Parkin能缓解鱼藤酮作用所诱导的Lamp 2a蛋白的下调，这提示在鱼藤酮作用时，Parkin还参与调节了分子伴侣介导的自噬。根据细胞免疫荧光实验结果显示，Parkin可以减轻鱼藤酮诱导微管解聚作用。流式细胞实验结果显示， Parkin没有有效缓解鱼藤酮诱导的MES23.5细胞凋亡作用。当我们在MES/PKN上联用NADPH，Parkin蛋白上调表达，ROS的释放进一步被抑制，细胞ATP生成增加，线粒体膜电位下降被抑制，但对于鱼藤酮诱导的细胞凋亡仍然没有明显的抑制作用。　　结论：　　在多巴胺能神经细胞中，Parkin能对抗环境毒素鱼藤酮诱导的氧化应激损伤和微管解聚作用，缓解线粒体的损伤，从而缓解鱼藤酮引发的神经毒性；NADPH能上调细胞内Parkin蛋白的表达，更好的发挥抵抗鱼藤酮的神经毒性作用，保护多巴胺能神经细胞。以上这些提示Parkin在PD的抗氧化应激损伤中发挥重要作用，NADPH除了自身的抗氧化作用外还能进一步上调Parkin的生理功能，从而为帕金森症的临床治疗提供新的策略。