胶原/肝素层层自组装修饰羟基磷灰石多孔义眼座血管化研究

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研究背景:眼球摘除术后,选择义眼座植入术弥补眶内容物缺失并配戴合适的义眼片,是修复眼球缺失、恢复面部外观较为理想的治疗方案。眼座植入眼眶后新生血管及纤维结缔组织沿微孔缓慢从外周向中央生长,此过程即为眼座血管化;若血管化未能及时进行,将导致眼座抗感染和抗排斥的能力降低,同时生物学性能大大下降。因此,改善眼座材料的理化性能,显著提高植入物的生物相容性和生物活性,降低眼座植入术后并发症的发生率,是提高患者生存质量的有效途径。目的:研究利用层层自组装技术制备胶原(COL)/肝素(HEP)多层膜复合羟基磷灰石(HA)多孔眼座的可行性,以提高眼座材料的生物相容性和血管化性能,并体外实验表征材料的生物学性能。以期为进一步体内实验提供实验基础,推动新型促血管化义眼座的研发。实验方法:本实验采用静电吸引层层自组装COL/HEP多层膜,将HA支架浸入到COL乙酸溶液,使HA多孔支架内表面吸附上一层带正电的COL,洗去多余的COL。然后将材料置于HEP溶液中浸泡,以吸附一单分子层HEP,并使HA多孔支架内表面带上负电,再漂洗除多余的HEP。重复上述步骤,在HA多孔支架内表面组装5个COL/HEL双分子层,分别对材料进行材料学和生物学表征。结果:热重分析测HA支架中COL、HEP组装质量百分比为0.87%。PBS中1周降解质量百分比0.38%。万能测试仪表征材料力学性能,组装后支架力学性能无明显改变。通过扫描电镜表征材料表面和多孔支架内部结构。FITC荧光标记COL,层层自组装FITC-COL/HEP后,激光共聚焦显微镜证实COL-HEP多层膜均匀的分布在多孔支架孔壁上。用材料3D培养人脐静脉内皮细胞(HUVEC),将细胞接种至多孔材料,96h后进行FDA染色,荧光显微镜观察细胞形态,表明两种材料均利于内皮细胞生长,复合支架HUVEC粘附更多。以1天、3天、7天和2周为时间点进行MTT实验,结果表明组装后支架有更好的生物相容性。初步构建鸡胚模型,评价眼座材料的体内短期促血管化能力。结论:初步探索制备了新型促血管化眼座材料,初步证实其具有良好的材料学性能和生物相容性,为进一步深入研究提供实验基础。
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