腹腔镜手术和开腹手术对阑尾炎儿童TLR4信号通路的影响

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目的:外科手术作为一类特别的创伤形式,在损伤局部组织的同时,也可引起全身应激反应,严重影响患者术后恢复。尽管已有研究表明,手术患者免疫系统功能与应激程度密切相关,但具体机制仍有待进一步研究。本课题拟通过比较阑尾炎儿童手术前后TLR信号的变化,探讨不同手术方式引起的应激反应对TLR介导的固有免疫反应的影响。方法:选择阑尾炎急诊手术患儿共39例,其中腹腔镜阑尾切除术组(Laparoscopic appendicectomy,LA)17例,开腹阑尾切除术组(Openappendicectomy,OA)22例,分别于术前、术后及术后一天采集外周血3ml,检测血浆中C-反应蛋白(C-Reactive Protein,CRP)、肿瘤坏死因子-ɑ (Tumor Necrosis Factor-alpha,TNF-ɑ)和白细胞介素-6(Interleukin-6,IL-6)的浓度;采用流式细胞术检测各时间点外周血单核细胞表面CD14、MD-2及TLR4的表达水平,以及LPS刺激后单核细胞内p38、ERK1/2及Stat3的活化程度;同时,检测刺激上清液中TNF-a、IL-6的表达水平。结果:1.LA组术后血浆中CRP、TNF-ɑ、IL-6水平均较术前明显增高,术后一天开始下降,但仍高于术前水平;OA组血浆中CRP、TNF-ɑ、IL-6水平变化与LA组一致, OA组术后和术后一天CRP、TNF-ɑ、IL-6水平均比LA组高。2.LA组术后单核细胞上MD-2和TLR4水平明显降低,术后一天恢复;OA组MD-2和TLR4的变化与LA组一致,但术后MD-2和TLR4的表达水平均低于LA组,差异有统计学意义(P<0.05);另外,LA组术后单核细胞上CD14水平无显著变化,而OA组术后CD14水平明显下降,术后一天恢复。3.LA组术后单核细胞经LPS刺激,p38、ERK1/2、Stat3活化水平与术前比无明显变化;而在OA组术后p38、ERK1/2、Stat3活化水平显著下降,术后一天恢复。术后OA组p38、ERK1/2、Stat3的活化水平均明显低于LA组。4. LA组外周血经LPS刺激可以大量表达TNF-ɑ和IL-6,LA组术后各时间TNF-ɑ和IL-6的水平无明显变化;OA组经LPS刺激后大量表达TNF-ɑ和IL-6的水平,术后TNF-ɑ和IL-6的水平明显下降,差异有统计学意义(P<0.05),术后一天恢复,术后各时间TNF-ɑ和IL-6的水平均低于LA组。结论:1、阑尾炎切除术可引起术后短暂的全身性炎症反应,但腹腔镜手术导致的急性炎症反应程度较开腹手术轻微;2、开腹手术可导致单核细胞表面CD14、MD-2及TLR4的表达水平下降,腹腔镜手术可在一定程度上缓解单核细胞的应激反应。3、开腹手术可导致单核细胞内TLR4信号通路抑制,从而在LPS刺激下无法产生足量的TNF-ɑ和IL-6,腹腔镜手术可在一定程度上缓解应激反应的影响。
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