【摘 要】
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目的探讨在二氧化钛(TiO2)纳米管表面固定GL13K抗菌肽的方法并对其效果进行比较,筛选出其中一种最佳的固定方式,为钛种植体表面的抗菌改性及种植体周围炎治疗研究提供新的思路
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目的探讨在二氧化钛(TiO2)纳米管表面固定GL13K抗菌肽的方法并对其效果进行比较,筛选出其中一种最佳的固定方式,为钛种植体表面的抗菌改性及种植体周围炎治疗研究提供新的思路。方法采用阳极氧化的方法,在纯钛基材表面原位构建高度有序排列TiO2纳米管多孔结构,将GL13K抗菌肽固定至TiO2纳米管表面,通过观察样品的表面形貌、组成成分和抗菌成分释放动力学检测等比较几种方法固定抗菌肽的效果,并利用体外抑菌实验评估纳米管表面的抗菌涂层对牙龈卟啉单胞菌的抗菌效应。具体实验内容如下:1、钛片的处理及TiO2纳米管的制备制备直径为15mm的圆形光滑钛片,使用阳极氧化的方式在钛片表面构建TiO2纳米管的多孔结构,并利用FESEM观察钛基材表面的形貌特征。2、TiO2纳米管表面装载GL13K抗菌肽将钛纳米管组作为空白对照(A组),采用物理吸附法(B组)、共价结合法(C组)及层层自组装法(D组)将GL13K抗菌肽固定至TiO2纳米管材料表面,通过接触角测量仪、傅里叶红外光谱、X射线光电子能谱仪、正置荧光显微镜以及紫外分光光度计分别对上述四组样品进行分析,以检测TiO2钛纳米管表面固定GL13K抗菌肽的效果。3、装载GL13K抗菌肽的TiO2纳米管材料对牙龈卟啉单胞菌的抑制作用厌氧条件下,将装载抗菌肽的钛纳米管材料放置在含有牙龈卟啉单胞菌的血平皿中48-72h,观察材料周围是否存在抑菌环,不同时段分别检测牙龈卟啉单胞菌细菌悬液的浓度值,从而评估材料的抗菌率。结果:1、光滑钛片的表面呈镜面状;钛纳米管呈特有的蜂窝管状结构,管腔直径较为均匀,平均约80nm,纳米管高度约2.4um;2、接触角检测显示实验组的接触角相对于空白对照组均有不同程度增加,表明实验组材料的亲水性减弱;XPS分析结果显示400eV处,实验组氮元素的波峰较对照组均明显上升,表明GL13K抗菌肽成功固定至钛纳米管材料表面;FTIR检测结果显示1630cm-1时实验组的波峰均与GL13K抗菌肽的波峰一致,表明抗菌肽成功固定至钛纳米管材料表面;免疫荧光分析结果显示对照组材料表面未见明显荧光分布,实验组材料表面均可见不等量的荧光,证实抗菌肽已成功固定至TiO2纳米管材料表面。抗菌肽的释放曲线可见自组装组的样品表面至第5天时仍有抗菌肽持续释放,表明该组的缓释效应优于其它两组;3、TiO2纳米管-GL13K抗菌肽的抗菌药物涂层具备一定的抗菌能力。结论:三种方法均成功将GL13K抗菌肽接枝至TiO2钛纳米管表面,成功构建抗菌药物涂层,其中,层层自组装法的缓释效应最佳,对牙龈卟啉单胞菌有良好的抑制效果,有望改善钛种植体表面的持续抗菌性能。
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