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目的:检测Beta Protein 1(BP1)在乳腺组织中的表达并探讨BP1与乳腺癌临床病理因素的关系及其与Bcl-2表达的相关性。
方法:运用RT-PCR、Western blot及免疫组织化学方法检测45例乳腺癌组织和相应癌旁组织中BP1的表达。运用RT-PCR、Western blot及免疫组织化学染色检测45例乳腺癌组织中Bcl-2的表达。间接免疫荧光双标法观察乳腺癌组织中BP1和Bcl-2有无共定位。
结果:
1.乳腺组织中BP1的表达情况:① RT-PCR:癌组织中BP1mRNA阳性率75.6% (34/45),相应癌旁组织中BP1mRNA阳性率17.8% (8/45),两组相比差别有统计学意义。②免疫组织化学:癌组织中BP1蛋白阳性率66.7% (30/45),相应癌旁组织中BP1蛋白阳性率13.3% (6/45) 两组相比差别有统计学意义。③Western blot半定量分析:癌组织中BP1蛋白表达水平为1.010±0.473,相应癌旁组织中为0.146±0.108,两组相比差别有统计学意义。三种检测方法分别从基因和蛋白水平得到一致的结果,癌组织BP1表达均明显高于癌旁组织。
2.BP1表达与乳腺癌临床病理因素的关系:BP1高表达与雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)及C-erbB-2有相关性,而与患者年龄、绝经状况、病理类型、肿瘤大小、淋巴结转移、临床分期、Ki-67无相关性。
3.乳腺癌组织中BP1与Bcl-2表达的相关性:①RT-PCR:BP1mRNA的表达量为0.864±0.668,bcl-2 mRNA的表达量为0.832±0.572,相关系数为0.673。②Western blot:BP1蛋白表达水平为1.010±0.473,Bcl-2蛋白表达水平为0.855±0.254,相关系数为0.648。③免疫组织化学:BP1阳性细胞数为374.31± 139.00,Bcl-2阳性细胞数为259.53±118.79,相关系数为0.609。结果表明BP1与Bcl-2的表达存在正相关。
4.间接免疫荧光双标法:激光共聚集显微镜下观察到BP1与Bcl-2共定位于乳腺癌细胞的胞浆中。
结论:BP1在乳腺癌组织中高表达,BP1基因是导致乳腺癌发生的一种癌基因并可能成为乳腺癌中新的治疗靶点。BP1蛋白可能促进乳腺癌的发生发展,并可能成为新的肿瘤分子标志物有利于乳腺癌的早期诊断。BP1与ER、PR及C-erbB-2有相关性。BP1与Bcl-2的表达存在正相关,BP1可能通过上调Bcl-2抑制乳腺癌细胞的凋亡,这可能是其发挥致癌作用机制之一。